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(四) 复制的其它方式 1.逆转录病毒基因组的复制 逆转录病毒:基因组是RNA分子 1)逆转录:以RNA为模板合成DNA的过程 2)逆转录酶:依赖RNA的DNA聚合酶 3)逆转录病毒基因组的复制过程 RNA DNA RNA 2. 滚环复制 滚环复制(rolling circle replication)是噬菌体中常见的DNA复制方式。许多病毒DNA的复制、质粒DNA的复制,以及许多基因扩增时都采用这种方式. 3. D环复制 首先在动物线粒体中被发现 1)线粒体\叶绿体DNA\某些质粒的复制为D环复制 2)特点 内外环复制起点不在同一位置 内外链的复制不同步 两条链的合成高度不对称,一条链上迅速合成出互补链,另一条链则为游离的单环。 4.单链环形DNA的复制 如 F or Fi X174 噬菌体 遗传物质为单链环形DNA分子 两个阶段: ‘-’ strand的合成 ‘+’ strand的合成 Cancer risk and oxidative DNA damage in man. These include oxidative damage to DNA, which experimental studies in animals and in vitro have suggested are an important factor in carcinogenesis. The most abundant of DNA lesions , 8-oxo-7,8-dihydro-2-deoxyguanosine (8-oxodG), is also the most mutagenic, resulting in GT transversions which are frequently found in tumor relevant genes 第二节 RNA的生物合成 概述 原核生物RNA的合成 真核生物RNA的合成 45SrRNA(28S、 18S、 5.8SrRNA的前体) 2) 剪接 将初始转录产物中内含子去除,并把外显子连接为成熟的mRNA分子的过程. 边转录边剪接 核内不均一RNA(HnRNA):真核生物DNA转录生成mRNA的初级转录物和各种剪接中间体的混合物. (三) RNA聚合酶Ⅱ的启动子 RNA聚合酶Ⅱ的启动子的特殊序列: TATA盒:–30 CAAT盒: -70--80bp(CCAAT) GC盒: -80--110bp Inr:起始元件(下游) 每个启动子只有上述4个序列中的2-3个 顺式作用元件:基因中参与基因转录调控的DNA序列。 反式作用因子:识别和结合顺式作用元件,参与基因表达调控的因子。 (四)转录过程 1、起始 TBP( TATA盒结合蛋白)识别TATA盒,在启动子部位结合多种TF,形成closed complex DNA解旋 open complex RNApol Ⅱ的C-末端结构域被磷酸化修饰 转录起始 【特定基因的转录还需要其他特定蛋白因子(如调控蛋白)的协助】 2、延伸 合成60-70bases后,TFⅡE与TFⅡ H脱离聚合酶,结合延伸因子,进入延伸阶段。 TFⅡS:提高转录速度和转录精确性 FACT(Facilitates Chromatin Transcription) :促染色质转录因子(破坏核小体的结构) 3、终止 转录终止与3′加尾紧密联系 (1)模板上的剪切信号序列被转录,酶复合体结合到mRNA上的剪切信号序列; (2)切除mRNA的3’端末端序列,并结合poly A聚合酶(PAP), 催化腺苷酸的聚合,形成poly A尾。 (3)聚合酶与模板分离,一次转录终止。 转录循环进行(transcription cycle) 注意: poly A尾不依赖模板 组蛋白的mRNA一般没有poly A尾 4、转录后的加工 (1)5′端带帽 (2)内含子的剪接 (3) 3′端加poly(A)尾 (4)特定位点的碱基编辑 (1) 5′-带帽(capping) 1)5′帽的形式: m7GpppG(A)···,m7GpppGmN,或m7GpppGmNm mRNA合成20-40bases后开始 2)形成 a:5 ’的一个磷酸基团被去除(RNA三磷酸化酶); b: mRNA前体 5 ’ 端β磷酸基团攻击游离G的α磷酸基团,形成5’-5’三
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