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日本牙鲆Toll样受体.ppt
日本牙鲆Toll样受体14分子（TLR14）克隆与表征 Molecular cloning and characterization of Toll-like receptor 14 in Japanese flounder, Paralichthys olivaceus 报告人：吴功倍 2010级生科2班 摘要 1、Toll样受体（TLRs）对于入侵病原体固有免疫应答活化是至关重要的。鱼类特有的TLR14已经在几种鱼类中得到鉴定，但其功能尚不清楚。 2、在本研究中，经过注射出血性败血症病毒、革兰氏阳性海豚链球菌和革兰氏阴性爱德华氏菌，日本牙鲆TLR14基因（jfTLR14）已被克隆，且该基因的表达谱也已得到分析。 jfTLR14 cDNA编码区长2607 bp，能编码878个氨基酸残基。 3、jfTLR14 在健康牙鲆头肾中高丰度表达。jfTLR14对于应答所注射的出血性败血症病毒和海豚链球菌，其表达只于1dpi升高，而对爱德华氏菌的应答表达则从1dpi增加到6dpi。这些结果意味着jfTLR14在注射爱德华氏菌的免疫应答中参与程度较其他注射病原体的高。 关键词： Toll样受体14（TLR14）；牙鲆；固有免疫；爱德华氏菌 一、引言 1、TLRs是Ⅰ型跨膜受体的一个家族，在对入侵病原体病原相关分子模式（PAMPs）的识别中扮演着重要的角色。它们由一个配体LRR识别区、一个跨膜区和一个胞内Toll/白介素1受体信号区组成。 2、目前，TLR1-TLR13在哺乳动物中已被鉴定。然而，有趣的是，现在在硬骨鱼类中已经鉴定出了15种TLR，包括与哺乳动物同源的TLR和鱼类特有的TLR 。其中，TLR5、 TLR14、 TLR21和TLR22还并未在哺乳动物中得到鉴定。 3、在鱼类中，TLR14属于由TLR1、TLR2、TLR6、TLR10所组成的TLR2亚家族。而在哺乳动物中，TLR2亚家族更倾向于与彼此形成识别多种微生物成分的异二聚体。 TLR6和TLR10在哺乳动物基因后期出现进化，而在鱼类基因中却没有。所以， TLR14有可能是哺乳动物产生免疫应答抵御多种水生病原体 TLR6和TLR10的功能替代者。 4、这里，我们将报导日本牙鲆jfTLR14的鉴别与分子鉴定。对于注射出血性败血症病毒、革兰氏阳性海豚链球菌和革兰氏阴性爱德华氏菌后jfTLR14的表达也将进行定量实时PCR分析。 二、材料与方法 1）jfTLR14分子克隆； 2）jfTLR14外显子/内含子结构的确定； 3）健康鱼体内jfTLR14基因的表达检测； 4）注射出血性败血症病毒、革兰氏阳性海豚链球菌和革兰氏阴性爱德华氏菌对jfTLR14基因表达的影响。 三、结果 1. jfTLR14cDNA与基因的鉴定 2. jfTLR14基因表达 四、讨论 虽然TLR2亚家族能够识别一系列代表多种物种的病原体成分，但是TLR14的功能仍然不清楚。这些结果意味着jfTLR14对革兰氏阴性细菌感染的相关免疫防御能力比革兰氏阳性细菌感染和病毒性感染的都要紧密。 * * 专业论文读书报告 *
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