微生物的培养和应用(精选).docVIP

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微生物的培养和应用(精选)

学习内容: 微生物的培养和应用-1 学习目标:进行微生物的分离和培养;测定某种微生物的数量;研究培养基对微生物的选择作用 课前导学: 一、培养基 1.培养基的营养组成包括_______、_______、________、_________等。培养基除满足微生物生长的 、 特殊营养物质 和 等要求,培养乳酸杆菌时需要添加 ,培养霉菌时需要将培养基pH调节为 ,培养细菌时需要将pH调节为 性 。 2.培养基可以分为 和 。 3.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基:计算→称量→___________→________→搁置斜面或倒平板。培养基分装时,培养基的高度约为试管高度的____。搁置斜面时,斜面长度不超过试管总长的1/2。 无菌技术 1.获得纯净培养物的关键是 。 2.无菌技术主要包括________和________。实验室常用的消毒方法是 ,此外,实验室里还用 或 进行消毒,如使用化学药剂进行消毒,常用 、 等。常用的灭菌方法有 、 、 。 3.高压蒸汽灭菌法通常要求温度达到________℃、气压为________kPa,时间维持_______ _min。使用时要先把锅内的水煮沸,将_____________________后才将锅关闭;出锅时,必需待压力表指针指向______点才能打开排气阀,其目的是防止容器中的液体暴沸。 4.为避免周围环境中微生物污染,实验操作应在___________附近进行。 三、接种技术 1.常用的接种工具有________、________、__________。 2.最常用的接种方法:______________、______________。 3. 标准 菌落:____个细菌在______培养基上大量繁殖时,形成具有一定形态结构的子细胞群体。 4.平板划线法注意事项: a.操作的第一步、每次划线之前、划线操作结束时都要灼烧接种环。 b.灼烧接种环之后要等其冷却再进行划线。 c.第二次划线以及其后的划线操作,都是从上次划线的末端开始。 d.划线时最后一区域不要与第一区域相连。 e.划线用力大小要适当,防止用力过大将培养基划破。 5.系列稀释操作 注意:移液管需要经过灭菌。操作时,试管口和移液管应在离火焰1~2 cm处。 6.涂布平板操作法 例题精讲: ①化学消毒 ②灼烧灭菌 ③干热灭菌 ④紫外线灭菌 ⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法 A.⑤③②①④⑥ B.①②③④⑤⑥ C.⑥②③④①⑤ D.③④②①⑥⑤ ( ) 3.如图是微生物平板划线示意图,划线的顺序为12345。下列操作方法正确的是 ( ) A.操作前要将接种环放在火焰附近灼烧灭菌 B.划线操作须在火焰上进行 C.在5区域中才可以得到所需菌落 D.在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌 4.下表是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的培养基配方。请回答: 试剂 牛肉膏 蛋白胨 NaCl 琼脂 水 用量 5 g 10 g 5 g 20 g 1 000 mL ⑴培养基的类型有很多,但培养基中一般都含有水、碳源、________和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是______________。 ⑵该培养基从物理性质上分类属于__________,从化学成分分类属于_____________。 反馈矫正: ( ) A.室温 B.37℃左右 C.50℃左右 D.0℃左右 以下操作用到接种环的是 ( ) A.平板划线操作 B.系列稀释操作 C.涂布平板操作 D.倒平板操作 关于牛肉膏蛋白胨固体培养基的配制需要在火焰旁操作的是 ( ) A.称量 B.灭菌 C.溶化 D.倒平板 能排除培养基是否有杂菌污染的方法是 ( ) A.将未接种的培养基放在实验桌上培养 B.将未接种的培养基放在窗台上培养 C.将未接种的培养基放在恒温箱中培养 D.将已接种的培养基放在恒温箱中培养 下列有关平板划线操作正确的是 ( ) A.使用已灭菌的接种环、培养皿,操作过程中不再灭菌 B.打开含菌种的试管需通过火焰上方灭菌,取出菌种后需马上塞上棉塞 C.把皿盖打开,将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线即可 D.最后将平板倒置,放入培养箱中培养 产生标准菌落的细菌的最初数目和培养基分别是 ( ) A.一个细菌,液体培养基 B.许多细菌,液体培养基 C.一个细菌,固体培养基 D.许多细菌,固体培养基 用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时 ( ) ①可以用相同的培养基 ②都需要使用接种针进行接种  ③都需要在火焰旁进行接种  ④都可以用来计数活菌 A.①② B.③④ C.①③ D.②④ 细菌的计数:当菌落数目稳定时,选取菌落数在_________的平板进行

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