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浙江大学生物化学实验甲酶的基本性质-温度对酶活力的影响
酶的基本性质（3）-温度对酶活力的影响 1.1、最适温度的概念 酶的最适温度：酶活力最大（或酶促反应速度 最大）时的温度。高于或低于最适温度，酶活力均降低。 如用酶活力对温度作图，则通常具有钟罩形曲 线的特征。 酶的最适温度不是酶的 特征常数，底物、作用 时间、pH等对其有影响。 酶的基本性质（3）-温度对酶活力的影响 温度对酶催化的反应有双重影响，一方面，在 一定范围内，随温度的升高酶促反应速度加快，直至到达最大值； 另一方面，由于酶是蛋白质，随温度的升高，酶蛋白逐渐变性，反应速度越来越小。高温，则酶变性失活。 1.2、原理 酶的基本性质（3）-温度对酶活力的影响 1、唾液淀粉酶活力的测定原理 酶的基本性质（3）-温度对酶活力的影响 2、蔗糖酶活力的测定原理 酶的基本性质（3）-温度对酶活力的影响 1.3、材料与试剂 1、实验材料 干酵母粉，新鲜唾液，淀粉，蔗糖 2、试验试剂 蔗糖酶液，唾液淀粉酶液的配制及注意事项参 P104 3，5-二硝基水杨酸（DNS）试剂，使用时的注意事项参P104 1.4、操作方法 酶的基本性质（3）-温度对酶活力的影响 操作过程及各步注意事项参P104 1.5、实验结果及处理 1、唾液淀粉酶最适温度的测定 仔细观察记录各管颜色，以反应液温度为横坐标，反应液颜色的深浅程度（代表酶活力的大小）为纵坐标，绘制温度-酶活力曲线，并根据各管的颜色或温度-酶活力曲线判断酶的最适温度。 酶的基本性质（3）-温度对酶活力的影响 2、蔗糖酶最适温度的测定 以反应温度为横坐标，相应的OD540的值（表示反应速度）为纵坐标，绘制温度-酶活力曲线，并根据该曲线判断蔗糖酶的最适温度。 * * 最适T v T 淀粉 紫色糊精 红色糊精 无色糊精 麦芽糖 葡萄糖 淀粉酶 淀粉酶 淀粉酶 淀粉酶 淀粉酶 H2O H2O H2O H2O H2O I2 I2 I2 I2 I2 I2 蓝色 紫色 红色 不显色 不显色 不显色 （碘色） （碘色） （碘色） （金黄色） 还原糖 + 3，5-二硝基水杨酸 糖酸 + 氨基化合物 OH- △ 红棕色，540nm处具特征光吸收，OD540值与还原糖含量成正比，可据此进行比色测定。 （DNS试剂） 蔗糖 葡萄糖 + 果糖 蔗糖酶 H2O CH2OH OH O OH OH HO CH2OH O HO OH HO CH2OH +
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