不同固定方法对Pyk2免疫荧光染色的影响毕业论文.docVIP

 本科毕业论文 论文题目：不同固定方法对Pyk2免疫荧光染色的影响 学生姓名： 常新莲 学号： 20100130845 专业： 生物科学 指导教师： 孟小倩 学 院： 生命科学学院 2014年 5月18 日 毕业论文（设计）内容介绍 论文（设计） 题 目 不同固定方法对Pyk2免疫荧光染色的影响 选题时间 2014.1 完成时间 2014.5 论文（设计） 字数 9360 关 键 词 固定方法， Pyk2，小鼠胚胎细胞，免疫荧光染色 论文（设计）题目的来源、理论和实践意义： 题目来源：实验室课题 理论和实践意义： 论文（设计）的主要内容及创新点： 本实验研究了不同的染色前固定和透膜方法对小鼠二细胞胚胎内402位点磷酸化了的Pyk2蛋白免疫荧光染色情况的影响。本实验是利用技术对小免疫荧光组织化学技术，用激光扫描共聚焦显微镜进行装片观察，并对新的固定及透膜方法进行比较、分析、总结。建立了适合本实验的固定方法为免疫荧光细胞化学技术的改进提供了新思路。 附：论文（设计） 本人签名： 2014年 5 月 18 日 本文是以正常的雌性小鼠为研究对象，通过不同的染色前固定和透膜方法，以观察小鼠二细胞胚胎内402位点磷酸化了的Pyk2蛋白免疫荧光染色的检测情况，从而比较不同固定方法对蛋白Pyk2的影响。为以后检测402位点磷酸化了的Pyk2蛋白在小鼠胚胎细胞内的分布、特征、及其在小鼠胚胎发育过程中的功能的探究奠定基础。通过改进固定方法，提高酪氨酸激酶免疫荧光的染色效率。为以后对Pyk2蛋白的进一步研究打好基础。  目 录 1 引言 2 1.1 超数排卵和小鼠早期胚胎发育 2 1.2 Pyk2蛋白 3 1.3卵母细胞固定和压片技术 4 2 实验材料 6 2. 1 实验动物 6 2. 2 实验器材 6 2. 3 实验药品 6 2. 4 试剂配制 6 2. 5实验仪器 7 3 实验方法 7 3.1超数排卵和小鼠早期胚胎的收集 7 3.2免疫荧光染色 7 3.3 Pyk2在小鼠早期胚胎的定位 8 4 结果分析 9 4.1Tyr-402 p-Pyk2在小鼠早期胚胎中的定位 9 4.2不同固定方法对Pyk2在小鼠2细胞期胚胎中的定位..........................................................10 4.3实验分析........................................................................................................................11 参考文献 13 致谢 14  不同固定方法对Pyk2免疫荧光染色的影响 常新莲 （山东师范大学 生命科学学院 济南 250014） 摘 要: 探索有效的染色前固定胚胎细胞的方法, 以提高小鼠胚胎细胞免疫荧光染色的效率。采用2种不同的固定方法处理小鼠胚胎细胞: （1）用4%多聚甲醛( PFA)固定30分钟; （2）在固定液4%多聚甲醛( PFA)中加入0. 1% Triton X--100固定30分钟。经检测发现第二种方案免疫荧光染色的效率更好，可检测到更多的Pyk2蛋白定位在小鼠胚胎细胞接触面和皮层部分。 关键词:固定方法， Pyk2蛋白，小鼠胚胎细胞，免疫荧光染色 The Different Effect of Pyk2 Immunofluorescence Staining with Two Fixation Methods Xinlian Chang （College of Life Science, Shandong Normal University , Jinan 250014) ABSTRACT： This experiment is trying to study the effective method of fixation of embryonic cells