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- 2017-06-07 发布于重庆
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猪常见传染病的PCR诊断引物(精选)
一、猪繁殖与呼吸障碍综合征
引物序列
N-U:5′-GCAAGCAGCAAAAGAAAAAGAAGG-3′;
N-L:5′-GCGTCGGCAAACTAAACTCCACAG-3′
2、预期扩增片断长度为 309bp,
95℃预变性 5min 后,进行如下循环:94℃,30sec;
57℃,30sec;72℃,50sec,35 个循环。72℃延伸 30min。
猪圆环病毒
引物P1:5’-GAGTCTGGTGACCGTTGC-3’
P2:5’-TTCCTCCGTGGATTGTTC-3’ 493bp
95℃ 5min, 94℃ 50s,52℃ 50,72℃50s,35循环,72℃ 10 min
2、扩增目的片段大小为
3、反应:
10×buffer 2.5 dNTP 2.5mM 2 引物 P1 50pmol/μL 引物 P2 50pmol/μL r-Taq 5U/μL 0.2 ddH2O 16.3 DNA模板 Total 25
三、猪瘟’-GCTCCTGGTTGGTAACCTCGG-3’
CSFV2:5’-TGATGCTGTCACACAGGTGAA-3’
2片段大小:507bp
3反应条件:
采用 100 L反应体系, 在 20 L cDNA 产物管中加入 6 L
25 mmol/ L MgCl2 , 8 L 10 PCR 缓冲液, 100 pmol/ L引物
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