限制性核酸内切酶切割原理方法结果分析及应用.pptxVIP

限制性核酸内切酶切割原理、方法、结果分析及应用PPT制作：杜雨濛、张佳佳、陈靓课堂内容回顾：1、定义： 1、定义：限制性核酸内切酶是可以识别特定的核苷酸序列，并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶，简称限制酶。{Ⅰ型酶：具有DNA修饰的作用在非特异位点处切割DNA。Ⅱ型酶：是最重要的工具酶‘能在DNA分子内部的特异位点识别和切割DNA双链，所 以通常所说的限制性内切酶就指这一类酶。Ⅲ型酶：与Ⅰ型酶一样，具有限制与修饰活性，其切割位点很难预测2、分类：（根据酶的基因、蛋白质结果、依赖的辅助因子及DNA裂解的特异性，将限制性内切酶分为三种类型）Ⅰ型酶：具有DNA修饰的作用在非特异位点处切割DNA。Ⅱ型酶：是最重要的工具酶‘能在DNA分子内部的特异位点识别和切割DNA双链，所 以通常所说的限制性内切酶就指这一类酶。Ⅲ型酶：与Ⅰ型酶一样，具有限制与修饰活性，其切割位点很难预测。3、命名：规则：第一个字母（大写）：取自该酶的细胞属名第二、三个字母（小写）：该细胞的种名第四个字母（罗马数字）：代表同一菌株中 不同限制性内切酶的编号例如：EcoRⅠ、HindⅢ 等等限制性核酸内切酶切割原理1、Ⅰ类和Ⅲ类酶： 在同一蛋白质分子中兼有切割和修饰（甲基化）作用且依赖于ATP的存在。Ⅰ类酶结合于识别位点并随机的切割识别位点不远处的D