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酶学基础（三） 1.1.5 酶促反应的机制1. 酶－底物复合物的形成 (1)中间产物学说： E+S ES E+P 3、影响酶催化的有关因素 (1)底物与酶的靠近及定向 (2) “张力”和“形变” (3) 酸碱催化 (4) 共价催化 (5) 金属离子催化作用 3、影响酶催化的有关因素(1)底物与酶的靠近及定向 在酶促反应中，底物分子结合到酶的活性中心，一方面底物在酶活性中心的有效浓度大大增加，有利于提高反应速度； 另一方面，由于活性中心的立体结构和相关基团的诱导和定向作用，使底物分子中参与反应的基团相互接近，并被严格定向定位，使酶促反应具有高效率和专一性特点。 (5) 金属离子催化作用 金属离子可以和水分子的OH-结合，使水显示出更大的亲核催化性能。 ? 电荷屏蔽作用 电荷屏蔽作用是酶中金属离子的一个重要功能。 多种激酶(如磷酸转移酶)的底物是Mg2+-ATP复合物。 酶活力的测定的具体方法 1）比色法 适用于酶的催化产物与特定物质反应生成有色的溶液 2）分光光度法 产物吸光度值与底物不同 3）滴定法 4）量气法 5）同位素测定法 6）酶偶联分析法 酶活力的测定： 根据酶催化的专一性，选择适宜的底物，并配制成一定浓度的底物溶液； 根据酶的动力学性质，确定酶催化反应的温度、