1、蛋白质化学.ppt

一、理化性质 6、蛋白质的颜色反应 酚试剂（福林试剂）反应 —CH2—CHCOO- +NH3 HO + 磷钨酸-钼酸 蓝色化合物 酪氨酸 一、蛋白质理化性质 7、蛋白质含量的测定 考马斯亮蓝法：室温、2min、染色。 紫外吸收法：蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸，因此在280nm波长出有特征性吸收峰。蛋白质的OD280与其浓度呈正比关系。 凯氏定氮法： 一、理化性质 8、蛋白质的水解 酸、碱及蛋白质水解酶皆可破坏蛋白质的肽链使蛋白质经过一系列的中间产物，最后产生氨基酸，这些中间产物主要是蛋白胨。 蛋白质→蛋白胨→小肽→二肽→氨基酸 小结 蛋白质的相对分子质量 蛋白质的紫外吸收特性 胶体性质 蛋白质的两性电离及等电点 变性与凝固 别构作用、沉淀作用、沉降作用 蛋白质的水解 蛋白质的颜色反应：双缩脲反应、酚试剂（福林试剂）反应 二、蛋白质的分离、纯化 细胞破碎 抽 提 分 离 纯 化 鉴 定 细胞外：直接分离 细胞内 动物细胞 电动搅碎机 匀浆器 超声破碎法 植物细胞 匀浆器 石英砂研磨 微生物：溶菌酶+超声波处理 可溶性蛋白 不溶性蛋白 根据溶解度 二、蛋白质的分离、纯化 1、根据蛋白质溶解度不同进行分离 盐析：由于加入大量中性盐而导致蛋白质沉淀。 等电点沉淀法：蛋白质在等电点状态时颗粒之间的静电斥力最小（溶解度也最