7 离子交换法_生物分离工程.ppt

HD-2柱 HZ-803柱 007X7柱 提取工艺条件的设计 树脂 类型 形式 交联度 pH 料液 浓度 洗脱条件 强酸 阳树脂 盐型 H型pH↓ 用大网格树脂 分子量大 Co↓ Z1Z2 稀溶液 不必稀释 氨水 pHpK3 使α物↓ 不用有机溶剂 不用强碱 弱酸 阳树脂 pK5.7 盐型 α树↑ 同上 5.7pH7.5 α树↑α物↑ 同上 同上 不能用HCl 4.5pH7.5 稳定性 α物↑ 离子交换提取蛋白质 传统离子交换剂不适用于提取蛋白质 （1） 交联度大 （大分子不能进入） （2） 电荷密度高(结合太强） （3） 骨架憎水性强（蛋白质易变性) 要求：良好的亲水性、具有较大的均匀网格结构、粒度越小分辨率越高 骨架种类： 离子交换纤维素 交联葡聚糖 交联琼脂糖 聚乙烯醇类 亲水性树脂离子交换剂功能团 阴离子交换树脂 阳离子交换树脂 蛋白质的离子交换交换容量 亲水性离子交换容量不能达到无机离子交换容量 （1）蛋白质不能进入活性中心 （2） 一个蛋白质与多个功能基发生作用 吸附机理 （1）静电吸力 （2）憎水 （3）氢键 （4）被吸附蛋白表面进一步吸附 离子交换提取蛋白质 离子交换提取蛋白质 蛋白质离子交换分离的基本步骤 平衡 上样吸附 洗脱 再生 + + + + + + - - - - - - - anion exchange bead Equilibration 蛋白质离子交换基本步骤 Sample application and wash - - - - - - - - - - - + + + + + + - - - - 蛋白质离子交换基本步骤 Elution - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - + + + + + + + + + + + + - - 蛋白质离子交换基本步骤 Regeneration - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - + + + + + + 蛋白质离子交换基本步骤 Sample application and wash Elution Equilibration Regeneration - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + - - - - - - - - - - - 蛋白质离子交换基本步骤 软水和无盐水的制备 水处理中的几个基本概念 1.软化水:将水中硬度(钙、镁离子）去除或降低到一定程度的水，水在软化过程中，仅硬度降低而总含盐量不变。 ２.脱盐水:指水中盐类(主要是溶于水的强电解质)除去或降低到一定程度的水,其电导率为1.0—10.0 μs /cm 电阻率1万-100万欧·厘米,含盐量小于1-5毫克/升。 3.纯水:是指水中的强电解质和弱电解质(如SIO2,CO2等)去出或降低到一定程度的水.电导率为1.0—0.1 μs/cm；电阻率100万-1000万欧·厘米,含盐量小于1毫克/升。 4.超纯水:水中的导电介质几乎完全去除,同时不离解的气体,胶体以及有机物质(细菌等)也去除至很低程度的水。其电导率为0.1—0.055 μs电阻率大于1000万 ,含盐量小于0.1毫克/升.理想纯水(理论上)电导率为0.05 μs,电阻率为18.3兆欧·厘米。 水溶液的电导率（25℃） 30%H2SO4 1Ω·cm 106 μs/cm 海水 33 33×103 天然水 20×103 50 普通蒸馏水 1000×103 1 超纯蒸馏水 10×106 0.1 华震去离子水 20~100×104 5~1 电导率 电阻率 软水的制备 树脂： 阳树脂（强酸性） 阴树脂（强碱或弱碱，弱碱不能除去弱酸性阴离子硅酸，碳酸） 串联床 ： 强酸-弱碱； 强酸-强碱-弱酸