WB原理及操作注意事项详解.pptVIP

1. 较低的信号，低灵敏度 增强信号： 优化一抗 浓缩样品 选择更高敏感度的发光底物（millipore的 比Thermo的敏感很多） 2. 整体高背景和荧光高背景 减少曝光时间 荧光高背景针对免疫荧光wb，PVDF和NC膜会造成相当高的自发荧光背景，可选用Immobilon-FL,专门针对荧光检测使用，背景比PVDF低10倍，比NC低2倍 显影液放置30sec 显影液放置1min The high af?nity of PVDF for protein gives ef?cient transfer and high detection ef?ciency, but it can make background control more dif?cult. PVDF is the membrane of choice for stripping and reprobing. WB原理及操作注意事项 印迹法(bloting)是指将样品转移到固相载体上，而后利用相应的探测反应来检测样品的一种方法。1975年，Southern建立了将DNA转移到硝酸纤维素膜（NC）上，并利用DNA-RNA杂交检测特定的DNA片段的方法，称为Southern印迹法。而后人们用类似的方法，对RNA