原核表达试题.pptVIP

三、基因工程菌的遗传不稳定性及其对策 基因工程菌遗传不稳定性的表现与机制 改善基因工程菌不稳定性的策略 基因工程菌遗传不稳定性的表现与机制 工程菌遗传不稳定性的表现形式 基因工程菌的遗传不稳定性主要表现在重组质粒的不稳定性， 这种不稳定性具有下列两种表现形式： 结构不稳定性 重组DNA分子上某一区域发生缺失、重排、修饰，导致 其表观生物学功能的丧失 分配不稳定性 整个重组DNA分子从受体细胞中逃逸（curing） 基因工程菌遗传不稳定性的表现与机制 工程菌遗传不稳定性的产生机制 受体细胞中的限制修饰系统对外源重组DNA分子的降解 能量、物质的匮乏和外源基因表达产物的毒性诱导受体细胞 外源基因的高效表达严重干扰受体细胞正常的生长代谢 产生应激反应：关闭合成途径，启动降解程序 重组质粒在受体细胞分裂时的不均匀分配 这是重组质粒逃逸的基本原因 受体细胞中内源性的转座元件促进重组分子的缺失重排 基因工程菌遗传不稳定性的表现与机制 重组质粒的逃逸率 一部分细胞不再携带重组质粒，这些空载细胞数与总细胞数之比称为 当含有重组质粒的工程菌在非选择性条件下生长时，培养系统中 称为重组质粒的宏观逃逸率。重组质粒逃逸的原因有： 高温培养、表面活性剂（SDS）、药物（利福平）、染料（ 吖啶）促使重组质粒渗漏