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专题十六 生物技术实践专题
观察法光学显微镜操作技术
细胞学说——施莱登、施旺
细胞是一个有机体,一切动植物都是由细胞发育而来,并由细胞和细胞产物构成
细胞是一个相对独立的单位,既有它自己的生命,又对与其他细胞共同组成的整体的生命起作用
新细胞可以从老细胞中产生
理论思维和科学实验的组合
观察法——细胞水平的观察实验
B1-P7 实验 使用高倍显微镜观察细胞
B1-P18 实验 检测生物组织中的脂肪
B1-P26 实验 观察DNA和RNA在细胞中的分布
B1-P40 实验 体验制备细胞膜的方法
B1-P47 实验 用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体
B1-P61 探究 植物细胞的吸水和失水
B1-P115 实验 观察植物根尖分生组织细胞的有丝分裂
B2-P21 实验 观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片
B2-P89 实验 低温诱导植物染色体数目的变化
光学显微镜
操作技术
制作临时装片
临时装片的染色
低倍镜和高倍镜的使用
显微结构(um级)
光学显微镜可以观察到的细胞结构
细胞壁、液泡、叶绿体、细胞膜
细胞核(核膜、核仁、染色体)
线粒体、脂肪粒
中心体、纺锤体、细胞板
植物细胞(叶绿体)
亚显微结构(nm级)
需要用电子显微镜观察的细胞结构
核糖体
由膜构成的细胞器结构
病毒
光学显微镜的结构及使用
电光源显微镜
光源强度调节方式不同
转换器
与物镜
物镜的区别与使用
低倍物镜10× 高倍物镜40×
短 长
直径大 直径小
焦距大 焦距小
视野大 视野小
视野亮 视野暗
先用低倍镜找的观察目标(倒像)
换高倍镜前将目标移动到视野中央(反移)
转动转换器换用物镜
使用高倍物镜时只能使用细准焦螺旋调节焦距
相关技术1——制作临时装片
要求:透光,一层细胞
滴
洋葱表外表皮细胞临时装片的制备方法
要求:单层细胞!
紫色!
相关技术1——制作临时装片
展 观察叶绿体、观察细胞质壁分离
切 检测花生子叶细胞中的脂肪
压 观察根尖分生区细胞有丝分裂
涂 观察人口腔上皮细胞中的线粒体
要求:透光,一层细胞
相关技术2——染色
原理:利用染色剂的亲和性,使细胞中
某种成分或结构着色
使用:预处理(解离、漂洗)
去浮色
光学显微镜观察内容
观察细胞结构
观察细胞成分及分布
观察细胞生命活动现象
生物组织中脂肪的检测 ——染色观察细胞中的脂肪颗粒
花生子叶切片 薄
苏丹Ⅷ染液染色
酒精洗去浮色
滴蒸馏水制成临时装片
观察DNA与RNA在细胞中的分布
口腔上皮细胞涂片(酒精灯烘干)
8%HCl水解、蒸馏水冲洗
吡罗红甲基绿染色剂染色,制成临时装片
观察叶绿体
观察叶绿体形态及分布
观察胞质环流——细胞生命活动
观察细胞质壁分离及复原——细胞生命活动
观察线粒体——健那绿活细胞染色
观察生活状态的线粒体的形态和分布
用健那绿染液直接制作口腔上皮细胞临时装片
活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色
线粒体能在健那绿染液中维持活性数小时
探究植物细胞的吸水和失水
细胞生命活动探究实验
自身对照实验,应观察同一视野中细胞在不同浓度外界溶液中的变化,
换液操作不移动装片,不污染显微镜
观察细胞壁、细胞膜、液泡结构及变化
明确原生质层、质壁分离概念
原理及应用(测定细胞液浓度、质壁分离自动复原现象的分析)
观察细胞分裂
B1-P115 实验 观察植物根尖分生组织细胞的有丝分裂
B2-P21 实验 观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片
B2-P89 实验 低温诱导植物染色体数目的变化
生命活动的静态观察
观察分裂不同时期细胞特点,认识细胞分裂过程
装片制作过程
解离(HCl使细胞分离)
漂洗(去酸)
染色(碱性染液)
制片(压使细胞分散)
选用龙胆紫、醋酸洋红等碱性染液可将染色体染成深色,细胞其他结构也有不同程度着色,便于
观察分裂过程中细胞各个结构的变化,认识细胞分裂全过程。
根尖分生区细胞有丝分裂永久装片
间期
前期
中期
后期
末期
各时细胞数量期反映了该时期持续的时间
根尖分生区细胞有丝分裂临时装片
分生区细胞正方形、排列紧密的特点被破坏
花粉的形成(减数分裂)
1、基本方法:
A.直接观察(顺序观察和对比观察)
B.显微镜观察
(1)显微镜的使用方法
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