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电泳.ppt-湘南学院
* * 电 泳 湘南学院化学与生命科学系 1、掌握凝聚法制备氢氧化铁溶胶的方法; 2、观察溶胶的电泳现象并了解其电学性质。 3、用电泳法测定胶粒速度和溶胶ξ电位。 一、实验目的 二、实验原理 溶胶是一个多相体系,其分散相胶粒的大小约在之间,由于其本身的电离或选择性的吸附一定量的离子以及其他原因所致,胶粒表面具有一定量的电荷,胶粒周围分布着反离子。反离子所带电荷与胶粒表面电荷符号相反、数量相等,整个溶胶体系保持电中性。胶粒周围的反离子由于静电引力和热扩散运动的结果形成了两部分——紧密层和扩散层。溶胶是热力学不稳定体系。 1、 溶胶 2、电泳(electrophoresis) 由于离子的溶剂化作用,紧密层结合有一定数量的溶剂分子,在电场的作用下,它和胶粒作为一个整体移动,而扩散层中的反离子则向相反的电极方向移动,这种在电场作用下分散相粒子相对于分散介质的运动称为电泳。发生相对移动的界面成为切动面,切动面和液体内部的电位差成为电动电位或ζ电位。不同的带电颗粒在同一电场中的运动状态和速度是不同的,泳动速度与本身所带净电荷的数量,颗粒的大小和形状有关。一般说,所带的电荷数量越多,颗粒越小越接近球形,则在电场中泳动速度越快,反之,则越慢。 3、ζ电位 胶粒电泳速度除与外加电场的强度有关外,还与ζ电位的大小有关。而ζ电位不仅与测定条件有关,还取决于胶体粒子的性质。 本实验是用宏观电泳法,在一定的外加电场强度下通过测定Fe(OH)3胶粒的电泳速度然后计算出ζ电位。其原理如图所示。 U形管上有刻度可以观察溶胶界面移动的距离,管上方用一带有活塞1的横管相连接,使装入溶胶后液面能保持水平,上端的弯管是装电解液及插电极用的,U型管中部的活塞2及3其孔径等于U型管的内径。 (1) 各种电泳仪可能在使用上有些差别,但从原理上都是一致的。在电泳仪的两极间加上电位差E(V)后,在t(s)时间内溶胶界面移动的距离为D(m),即胶粒的电泳速度U(m?s-1)为: 从实验求得胶粒电泳速度后,可按照下式求出ζ(V)电位: (2) 式中?液体的粘度(泊);?是液体介电常数,此实验溶液稀,故采用纯水的?与?值,纯水的?值可依?=80-40(t-20)进行计算,?值可从附录表中查得;E是外加电压差(或电位梯度);l是两电极导电距离(cm);U是电泳速率(cm/s)。 三、实验仪器与药品 1、氢氧化铁溶胶制备 在250毫升烧杯中放95毫升蒸馏水,加热至沸腾,慢慢滴加入5毫升10%FeCl3溶液,并不断搅拌,加完后继续沸腾几分钟。由于水解的结果,得红棕色的氢氧化铁溶胶,其结构式可用下式表示: {m[Fe(OH)3]nFeO+(n-x)Cl-}x+·xCl- 2、将渗析好的Fe(OH)3溶胶冷却至室温,测其电导率,用0.1mol/LKCl溶液和蒸馏水配制与溶胶电导率相同的辅助液。 3、将电泳管先后用蒸馏水后用已渗析过的Fe(OH)3溶胶洗几次。在装Fe(OH)3溶胶之活塞2、3以上,关闭活塞,在活塞2、3下不能有气泡。将活塞2、3上部的溶胶倒掉,顺序用蒸馏水及辅助液洗涤三次,然后再装辅助液至支管口。尔后打开活塞1,使液面达支管口上部并使两液面水平。 将两电极与直流稳压电源相连,工作电压调至150-200伏之间。关闭活塞1,再小心的打开活塞2,3,观察界面移动的方向,当U形管两边溶胶的界面清晰后,打开停表,准确记录U形管两边界面各自移动0.5,1,1.5,2厘米时所需的时间。测完后关闭电源,用细铜丝测量两电极间的距离l,最后根据公式(2)计算ζ电势。 四、数据处理 1、确定?电势符号,即由胶粒移动方向确定胶粒带电荷符号。 2、求出速度U的平均值,再求出?电势。 *
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