第四章色谱进样技术.ppt

衬管的作用 保护色谱柱：不挥发组分滞留在衬管内。但当污染物积攒到一定量时，会吸附样品造成峰拖尾/分裂或出现鬼峰 衬管内少量经硅烷化处理的石英玻璃毛可防止注射器针尖的歧视（即针尖内的溶剂和易挥发组分首先汽化）；加速样品汽化；避免固体物质进入并堵塞色谱柱等 溶剂膨胀方程 溶剂蒸汽体积 = 22,400 x A x B x C x I A = 溶剂密度/溶剂分子量 B = 15/(15 + 柱头压 [in psi]) C = (进样口温度[?C] + 273)/273 I = 液体进样体积 [?L] 例如 1 ?L 水于 250 ?C 15 psi 柱头压产生 22,400 x 1/18 x 15/30 x 523/273 x 1 = 1,192 ?L 蒸汽 蒸汽膨胀因子（进样口250度，柱前压13psi) 分流进样需注意的问题 尽量减少分流歧视：分流比越大，越有可能造成分流歧视 保证样品快速汽化（适当添加经硅烷化处理的玻璃毛） 分流进样时，柱的初始温度尽可能高一些 柱安装时注意柱与衬管同轴 分流进样 不分流进样 柱初始温度尽可能低一些，最好低于溶剂的沸点10-20度。溶剂要与柱子固定相匹配。 衬管尺寸尽量小（0.25-1ml),使样品在衬管内尽量少稀释。最好使用直通式衬管,对于比较脏的样品,要加经硅烷化处理的玻璃毛并注意经常更换 根据样品(溶剂沸点,待测组分沸点,浓度等)优化开启分流阀的时间,一般在30-80秒之间,多用0.75分钟，可以保证95%以上的样品进入柱子. 溶剂效应 不分流进样 冷柱上进样 冷柱上进样是将样品直接注入处于室温或更低温度下的色谱柱内，再逐步升高温度使样品各组分依次汽化。 优点 消除进样口对样品的歧视效应。 避免热分解 容易利用溶剂效应 准确度与精密度均高于分流/不分流进样 缺点 进样体积小 操作复杂，对初始温度、溶剂种类、进样速度等要求较严格 易污染毛细管 适用于热不稳定化合物及痕量分析 冷柱头进样 程序升温汽化进样（PTV） 程序升温汽化进样（PTV）是将液体或气体样品注射于低温的进样口衬管内，再按程序升高进样口的温度。 优点： 无注射器头的样品歧视 不需要特殊注射器 抑制了分流歧视 可除去溶剂和低沸点组分，实现样品浓缩 可低温捕集气体样品，便于同阀进样或顶空进样技术结合 有多种操作模式，分流、不分流及溶剂消除模式 重线性接近于冷柱头进样 进样口维护 手动进样应注意的问题 注射速度快 取样准确，重现 避免样品间互相干扰 选用合适的注射器，用10ul进样器进样量不要小于1ul。 减少注射针尖歧视：每次进样速度尽量一致，玻璃毛放在衬管中间偏下位置，即针尖到达的位置。 取样后可用滤纸拭去针尖外面的残留样品，但要注意不要吸去针内样品 * 第四章 色谱进样技术 分流/不分流毛细管柱进样口分解图 插入件组件 衬管 绝缘层 垫圈 变径接头 保温层 垫圈 柱螺母 进样垫固定螺母 进样垫 O形环 分流出口管线 分流/不分流 进样口实体 固定螺母 分流平板 保温套 18740 - 80220 19251 - 60540 18740 - 60840 5181 -3316 900 uL 5183-4711 900 uL 5181 -3315 800 uL 250 uL 1000 uL 1000 uL 工厂去活处理 杀虫剂衬管 未去活 普通型 5181 - 8818 250 uL 直接进样 不分流 分流/不分流 不分流 分流 分流平板的维护 在溶剂中超声处理 烘干 用非氯化剂去活化 HMDS BSTFA BSA TSIM 用溶剂清洗 先惰性洗涤 - 甲苯 再用醇类清洗- 甲醇 烘干 此部件须非常清洁 进样口日常维护 定期更换进样垫 使用最低可用温度 使用气流吹扫 使用干净的衬管 用溶剂清洗分流平板 使用干净的进样针 总流量 50 mL/min 隔垫吹扫流量 3 mL/min 分流出口流量 46 mL/min 柱流量 1 mL/min Internal Detail 衬管 密封圈 柱子 槽 进样 Column Flow 1 mL/min Split Vent Flow 46 mL/min (Septum) Purge Vent Flow 3 mL/min Total Flow 50 mL/min 注射针 Sample Column Flow 1 mL/min Split Vent Flow 46 mL/min (Septum) Purge Vent Flow 3 mL/min Total Flow 50 mL/min Column Flow 1 mL/min Split Vent Flow 46 m