【大高考】2017版高考生物一轮总复习 专题25 基因工程（含转基因生物的安全性与生物武器）课件.pptVIP

* 专题二十五　基因工程(含转基因生物的 安全性与生物武器) 考点一　基因工程 1.基因工程的基本工具 (1)限制性内切酶 原核生物 磷酸二酯键 特定的核苷酸序列 黏性末端 平末端 (2)DNA连接酶 常用类型 E·coliDNA连接酶 T4DNA连接酶 来源 _______________________ T4噬菌体 功能 连接黏性末端 连接_________________ 大肠杆菌 黏性末端或平末端 (3)运载体 ②对载体的分析 条件 目的 稳定并能复制 目的基因稳定存在且数量可扩大 有一个至多个限制酶切割位点 可携带多个或多种外源基因 具有特殊的标记基因 便于重组DNA的鉴定和选择 质粒 小型环状DNA 分子 动植物病毒等 2.基因工程的操作程序(四步曲) 基因文库 PCR 启动子 首端 尾端 标记基因 鉴别和筛选 农杆菌转化法 花粉管通道 显微注射 DNA分 子杂交 分子杂交 抗原—抗 体杂交 个体生 物学水平 限制酶种类的确定方法 (1)根据目的基因两端的限制酶切点确定限制酶的种类 ①应选择切点位于目的基因两端的限制酶，如图甲可选择Pst Ⅰ。 ②不能选择切点位于目的基因内部的限制酶，如图甲不能选择Sma Ⅰ。 ③为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒，如图甲也可选择用Pst Ⅰ和EcoR Ⅰ两种限制酶(但要确保质粒上也有这