1个NDV即可引起鸡胚感染0224.docVIP

新城疫病毒孙荣华1，田志军2，张鹏1，郭云雷1 （1.青岛正大有限公司，青岛 266109） （2.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所哈尔滨 150001） 摘要接种到9-10d鸡胚中的ND LaSota或V4株弱毒培养24h，毒量可增加106倍以上，培养108h,毒量则增加1010倍以上。在对NDV的易感性方面，具有抗NDV母源抗体的鸡胚与SPF鸡胚无显著差异；。将LaSota株病毒悬液在理论上稀释至每胚接种量只有数个或个病毒时，仍可引起鸡胚感染。低毒量条件下固定病毒的数量，随着接种胚数的增加，感染率随之下降，但感染数在一定范围内波动，没有减少趋势。以上结果证实1个活的NDV粒子即可引起鸡胚感染。 关键词：新城疫病毒；中图分类号：S858.31 文献标识码： 文章编号： Newcastle Disease Virus growth in chicken embryo SUN Rong-Hua1,TIAN Zhi-Jun2,ZHANG Peng1,GUO Yung-Lei1 (1.Qingdao Chia Tai Co., LTD, Qingdao, 266109) （2. Harbin Veterinary Research Institute, CAAS,No. 427 Maduan Street, Harbin 150001） Abstract:, the 9-11d old embryo is the best tissue for multiplying Newcastle Disease (NDV), it can be multiplied 106 fold after incubation 24h and multiplied 1010 fold after incubation 108h. Blind passage is no effect for detection NDV. According to the characterization of NDV, it is no significant difference between the embryo from the SPF breed and the ND vaccinated. Fixed the number of NDV (3-20EID50) and injected various number of chicken embryo, the number of infected chicken embryos didn’t show decreasing trend. These results show that several or one live NDV can infect chicken embryo. Key word: NDV; chicken embryo; growth 病毒分离鉴定是确诊鸡新城疫（ND）最可靠的方法，关于新城疫NDV）的分离与鉴定，各种检验规程均规定，样品首次接种无特定病原体（SPF）鸡胚培养4至7天后尿囊液(allantoic fluid, AF)血凝试验（HA）反应阴性时须至少再用SPF鸡胚盲传一代，仍为阴性方能确定为阴性[1][2][3]。SPF鸡胚（成本至少10元），培养时间至少10天，对于一个年出口一千万只肉鸡的企业按千分之一的抽检率来计算，其检验成本至少需十万元还不包括人工费，且由于样品的采集量过低，不能正确反映鸡群感染NDV的状况，一旦被外方检出漏检样品，其损失将无法估量。能否选择一个即科学又实用的检验方法来弥补现有检验方法的一些不足呢？ 作者简介：孙荣华（1971-），男，云南沾益人，兽医师，从事鸡病的化验与诊断工作。 （地址：山东青岛市 城阳区 后桃林 青岛正大 动保中心，266109 电话：0532-4713819传真：0532-7737595；E-mail: srhqdct@163.com) 对NDV的易感性方面，普通鸡胚与SPF鸡胚间无明显差异普通鸡胚SPF鸡胚材料方法1.1 鸡胚SPF种蛋购自山东家禽研究所，本室孵化；普通鸡胚，为白壳种蛋（卵黄ND-HI平均抗体效价约为2），本室孵化。 1.2 NDV LaSota株弱毒疫苗，分别来自中牧股份南京药械厂，荷兰英特威公司，以色列夏菲特公司，瑞普保定生物药厂；ND V4克隆株弱毒疫苗，中国农业科学院哈尔滨兽医研究所生产。弱毒疫苗直接用于试验或经鸡胚增殖后用于试验。 1.3 用0.01MPBS液(pH为7.2)作为病毒的稀释液，鸡胚接种均采用尿囊腔途径接种，用微量法检测AF的HA滴度，用常规方法测定病毒液的EID50，用Reed-Muench法计算）[1]。