细胞工程-11讲第2节-组织工程应用分析.pptxVIP

第五篇 细胞疗法与组织修复 第11讲 组织工程 第2节 组织工程应用 1896 1920 1987 2006 1.组织工程牙齿 2.组织工程耳 3.组织工程皮肤 4.组织工程肾脏 人的牙齿？ 一 组织工程牙齿 细胞：牙齿上皮细胞、间叶细胞 支架：胶原蛋白凝胶 培养基：D-MEM（Sigma），10%FCS PDL:周围韧带 vWF:血管假性 血友病因子 NF-H:神经丝 蛋白 补充文献1: 2013年3月4日，英国伦敦国王学院（King’s College London）的研究人员提取成人牙龈组织细胞，将其与 取自老鼠的间质细胞结合，成功培育出一颗新牙。 研究人员从成人患者的牙龈中提取上皮细胞，在实验室里 大量培养，再将它们与老鼠的间质细胞混合。这种间 质细胞被培养出“诱导作用”——“指示”上皮细胞 开始发育成为牙齿。 研究人员把这种细胞混合物移植到老鼠身上，结果长出拥 有成活根部的人鼠混合牙。 补充文献2: D：牙本质；DP：牙髓；C： 牙骨质 二 组织工程耳 先以3D摄影机围绕患者头部拍摄耳朵照片，然后把几 何构造图输入电脑，用3D打印机输出，制成耳朵 软模型。 接着再把充满牛耳软骨细胞的特殊胶原蛋白胶注入软 骨，形成软骨骨架。 几周内软骨就会逐渐成长，取代覆盖其外的胶原蛋白 ，3个月后，柔软且具有功能的外耳就此长成。 FC：纤维鞘 Cartilage：软骨 EF：弹性蛋白纤维 三 组织工程皮肤 中国每年烧伤、溃疡等皮肤 疾病1500万人，需要皮肤移 植的约350万，需4亿立方厘 米。 人工表皮、复合人工皮 A 表皮 B 表皮网状棘 C 真皮乳头 D 真皮 E 皮下组织 F 毛发 组织工程皮肤技术路线 构建步骤 （1）种子细胞与培养液 成纤维细胞：DMEM培养基、10%胎牛血清、青霉素、 链霉素等。 表皮角质形成细胞：DMEM+Ham F-12培养基、表皮 生长因子等。 （2）支架材料 聚羟基乙酸（PGA）。 （3）构建成纤维细胞-PGA复合物 酶法消化收集真皮成纤维细胞，接种在PGA上，加入 培养液培养。 （4）接种表皮角质形成细胞在前面的复合物上，更 换表皮角质形成细胞培养基培养5天左右。 （5）双层皮肤成熟 将复合物放在可渗透膜上，进行气-液界面培养，促 进表皮角质形成细胞的进一步分化。 再培养1周，形成含真皮和表皮两层结构的组织工程 化皮肤。 难题： 1.血管化：血管生成是指内皮细胞构筑的毛细血管 分支和伸展。血管生成有助于损伤组织的修复。 2.毛囊、汗腺等再生。所以美容慎用。 3.排异性。 我国人造皮肤2007年第四军医大学开发成功，进入 临床阶段。 四 组织工程肾脏 细胞： 新生大鼠肾脏细胞 人脐带静脉上皮细胞 支架材料：去除了细胞的肾脏，包含皮层、脉管、 髓质、尿管等。 培养基：REGM、EGM2（Lonza） 大鼠 人、猪 组织工程问题与挑战 1.干细胞诱导分化技术 2.种子细胞分离与培养 3.接种支架材料的方法 4.支架材料的设计与优化 5.细胞因子的释放、与支架材料相结合的设计，种 子细胞表达 6.血管化 7.复杂性：多细胞协同培养、分化控制 8.体外组织器官再生机理有待揭示 。。。。。。 Science： 人工气管移植挑战极限 小结 组织工程三要素： 种子细胞 支架材料 生长因子 谢谢