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专题二 细胞工程
植物细胞工程
动物细胞工程
细胞工程
动物细胞培养
体细胞核移植技术
与克隆动物
动物细胞融合
单克隆抗体
过程
条件
应用
概念
过程
应用前景
概念
过程
应用
植物组织培养
植物体细胞杂交技术
原理、过程
过程、概念优势
目标引领
一、植物的组织培养II
二、动物的细胞培养与体细胞克隆I
三、细胞融合与单克隆抗体II
独立自学:
一、请说出植物组织培养的概念和原理
二、请说出植物组织培养的过程
1、概念:
在无菌和人工控制条件下,将离体的植物器官、组织、细胞,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株。
2、原理:植物细胞的全能性
3、过程:
外植体 愈伤组织 根、芽 植物体
再分化
脱分化
也叫:外植体
如:茎尖、根尖
适宜的温度、PH值、
养料、激素、充足氧气
条件
避光
需光
无细胞分裂、
分化能力
特点:具分裂、分化能力,既具全能性(主要)
无定形状态、高度液泡化、排列疏松、无规则、
无叶绿体,不进行光合作用
植物组织培养技术(重点理解 )
植物细胞工程的实际应用
植物繁殖的新途径
微型繁殖
作物脱毒
人工种子
作物新品种的培育
单倍体育种
诱导突变体
细胞产物的工厂化生产
原生质体
番茄细胞
原生质体融合
再生出细胞壁
杂种细胞
脱分化
愈伤组织
杂种植株
再分化
植物体细胞杂交技术(重点 理解):
1、过程:
马铃薯细胞
标志:成功融合
人工诱导
去壁
植物组织培养
植物细胞的融合
酶解法(纤维素酶、果胶酶等)
物理法:离心、振动、电刺激等
化学法:聚乙二醇(PEG)
将不同种的植物体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。
4、优势:(与有性杂交方法比较)
克服植物远缘杂交不亲和性
3、原理: 细胞膜的流动性和细胞全能性
主要:原生质体融合
结果
2、概念:
植物体细胞杂交技术(重点 理解):
动物细胞培养
从动物机体中取出相关的 ,将它分散成 ,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞
1概念:
动物胚胎或
幼龄动物的组织、器官
如:肾、肺等
细胞生命力旺盛,分裂能力强
原理:细胞增殖
使细胞和培养液充分接触
组织
单个细胞
生长和增殖
2、过程:
取什么样的组织?
如何将组织分散成单个细胞?
什么叫原代培养?
什么叫传代细胞培养?
如何进行传代培养?
什么是细胞贴壁现象?
什么是细胞接触抑制
取幼龄组织或器官
如:肾脏 肌肉
用胰蛋白酶处理
加入细胞培养液
细胞贴壁:培养过程中,细胞贴附在瓶壁上的现象。
要求:培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒
细胞接触抑制 :
细胞在贴壁生长过程中,随着细胞分裂,数量不断增加,最后形成一个单层,此时细胞间相互接触,细胞分裂和生长停止,数量不再增加。
原代培养:从机体取出后立即培养的细胞。
10代以内
用胰蛋白酶分散成单个细胞
传代培养:分瓶后的培养,从10代培养到40-50代细胞
2、过程
取 的组织、器官
细胞悬浮液
酶
贴满瓶壁的细胞
单个细胞
加入 液
动物胚胎或幼龄动物
胰蛋白
培养
接触抑制
原代 培养
1-10代细胞
40—50代细胞(细胞株)
传代培养
无限传代(细胞系)
用 处理
胰蛋白酶
遗传物质不变
遗传物质改变,
能无限增殖(癌变)
3、条件:
1、无菌、无毒的环境
2、营养
3、温度和PH
4、气体环境:
(添加一定量的抗生素,定期更换培养液)
补充合成培养基中缺乏的物质
36.5 +0.5度 ;PH为7.2-7.4。
O2作用:进行 呼吸,提供能量
CO2作用:维持培养液的PH值
(95%空气和5% CO2 )
(葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、动物血清、血浆等。)
有氧
比较:
培养结果
培养目的
培养基特有成分
培养基性质
原理
比较项目
细胞的全能性
植物体或组织
快速繁殖、培育无病毒植株等
蔗糖、植物激素
固体培养基
植物组织培养
细胞株、细胞系
葡萄糖、动物血清
液体培养基
细胞增殖
动物细胞培养
1、概念:
动物细胞核移植和克隆动物
将一个动物的细胞核,移入另一个去核的卵母细胞中,使其重组发育成一个胚胎,最终发育成动物个体。
结果:
原理:
分类:
克隆动物(用核移植方法得到的动物)
动物细胞核的全能性
胚胎细胞核移植、体细胞核移植
2、动物体细胞核移植的过程
供体细胞(供核)
细胞
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