微生物检验技术复习课2014分析.ppt

微生物检验技术 ——复习 第一章 绪论 了解微生物污染产品的来源（6个） 理解微生物检验涵义及意义（3点） 了解微生物检验的任务（5点）、范围（4点）和对象（7个） 了解为什么要学这门专业课 *第二章 细菌检验常规技术 1、微生物检验的基本程序?（食品微生物检验的一般程序） （7步，其中每步的具体内容） 2、食品微生物检验的指标?（4个） 3、微生物检验常规操作技术 4、微生物培养及实验基本操作技术包括哪些？（6个方面，其中具体内容） 例如：培养基的类型和用途? 微生物接种方法包括哪些？ 5、检验操作过程的无菌操作要求包括哪些内容？ 6、革兰氏染色方法：负染色方法 7、细菌、真菌、病毒如何分离纯化？ * 第一节 微生物检验的基本程序 检验前的准备 样品的采集 样品的送检 样品的处理方法 致病菌检验参考菌群的选择 样品的检验 检验结果的报告 * 食品微生物检测 微生物检测 常规微生物检测 致病微生物检测 常规微生物项目：细菌总数、大肠菌群、酵母总数、霉菌总数，此类细菌不致病，但会严重影响食品的外观及风味。目前常用微生物培养法来计数菌落，允许有该类菌落，但菌落总数不能超标。 致病微生物项目：沙门氏菌、李斯特菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157：H7、弯曲杆菌、致病弧菌、副溶血弧菌、志贺氏菌、假单胞菌等。致病微生物在食品中是绝对不允许存在的，所以快速检测食品中是否存在有致病微生物，是食品安全检验的重中之重。 实例： * 食品微生物检验的一般步骤 样品采集与送检 样品预处理 选择参考菌群 菌落总数 大肠菌群 致病菌 分离培养 分离培养 增菌 纯化 染色镜检 生化试验 血清学试验 动物试验 结果报告 检验前的准备 检验过程 *第三章 细菌生化试验和血清学试验 细菌生化实验定义、方法（原理）、注意事项 细菌鉴定的生化实验原理及现象 1、糖（醇）类代谢试验 2、氨基酸和蛋白质代谢试验 3、有机酸盐和铵盐的利用试验 4、呼吸酶类试验 5、毒性酶类试验 * 1、糖醇类代谢试验 （一）糖醇类发酵试验 （二）葡萄糖氧化发酵（O/F）试验 （三）V-P试验 （四）甲基红（Methyl Red）试验 MR （五）七叶苷水解试验 （六）甘油品红试验 * 制备好的培养基对照管 培养基不变色 非发酵菌 斜面红色， 底面黄色 培养基全黄色 斜面黄色、底部黑色，并产生H2S 斜面红色，底部黑色，产生H2S 底面黄色，并产生CO2 * 5、毒性酶类试验 溶血试验 链激酶试验 卵磷脂酶试验 血浆凝固酶试验 * 甲型（α-）溶血 乙型（β-）溶血 丙型（γ-）溶血 第四章 细菌常规检验 各论 细菌：20种 显微形态及染色特征 培养特性 生化特性 检验方法 大肠埃希氏菌、沙门氏菌 金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌 副溶血弧菌 蜡样芽孢杆菌 产气荚膜梭菌 单核增生李斯特菌 布氏杆菌 椰毒假单胞菌酵米面亚种 空肠弯曲菌 结核分枝杆菌 第五章 真菌及真菌毒素的检验 1、了解真菌的定义、分类、培养条件和方法、菌落形态 2、霉菌的鉴定步骤，真菌产毒特征 3、真菌毒素的种类、毒性作用和检测方法： (一)化学检验法； (二)免疫学检验法； (三)生物学检验法 真菌毒素的种类 肝脏毒 主要致肝细胞变性、坏死，或引起肝硬化、肝癌，如黄曲霉毒素等。 肾脏毒 主要引致急性或慢性肾脏病变，可使肾功能完全丧失，如橘青霉素等。 神经毒 主要造成大脑和中枢神经系统的损害，引起严重的出血和神经组织变性，如黄绿霉素。 造血组织毒 主要损害造血系统，发生造血组织坏死或造血机能障碍、白血球减少症等，如某些镰刀菌毒素。 中毒性 肝脏毒 肾脏毒 神经毒 造血组织毒 致畸、致癌、致突变 毒素的产生 首先取决于菌株，其次依赖于外界环境，如基质、温度和湿度。 基质对霉菌的生长和产毒有一定的影响。一般而言，真菌产毒菌株主要在食物、粮食、饲草等植物上生长产毒，在乳、蛋等动物源基质上产毒能力较低。 霉菌的生长繁殖与温度有密切关系，大多数最适温度为25~30℃，低于l0℃或高于40℃生长减弱，产毒素能力也会受到影响。 基质的水分、空气的湿度与真菌的生长繁殖和产毒素能力密切相关，基质含水量在17%~18%时为真菌产毒素的最适条件。 中毒性 毒素的检验 实例 检测真菌毒素有许多方法，如检测黄曲霉毒素有生物学方法和ELISA法等。 生物学方法主要用于检测真菌毒素的毒性，如用鸡胚、小白鼠作毒性试验，观察动物中毒死亡或出现肿瘤。 ELISA法操作简便，并具有安全快速高效、费用低，适用于大批量标本的筛选。 中毒性 4、真菌的常规实验室检验法（镜检、培养） 5、真菌的主要生化反应实验（7个） 6、病原真菌的分类和特征 （1）感染性：新生隐球菌、荚膜组织胞浆菌、白色念珠菌的微生物