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- 2016-08-25 发布于湖北
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第四章 基因工程载体Vesctors for Genetic Engineering 作为一个理想的载体,应具备以下条件: 第一节 微生物基因工程载体 一、质粒载体 细菌质粒 (plasmid) 载体是基因工程 中最常用的载体, 它必须包括三种组成部分: 复制必须区,选择标记基因和限制性核酸内切酶的酶切位点(克隆位点,MCS). 质粒DNA分子具有三种构型: Closed circle DNA, ccDNA; supercoil; SC构型 Open circle DNA, OC构型; Liner DNA, IDNA; L构型. 1. 严紧型和松驰型质粒 严紧型质粒:在宿主细胞中的拷贝数较少,一般只有1~3个 松驰型质粒:其拷贝数较多,一般20~60个,多的可达200~300个 2、转移型和非转移型质粒 3. 质粒的不相容性和不亲和群 (二)、质粒的命名 1、人工组建的质粒 (三)、常用质粒载体 1. pSC101 2. pBR322 (1)组成 (2)特点 (3)重组克隆的 “插入失活”筛选方法 3、pUC系列质粒载体 (1)特点 可用组化方法鉴别: 可通过插入失活法进行筛选 二、噬菌体载体 (一)、λ噬菌体载体 2、λ噬菌体的缺陷与改造 λ噬菌体的改造 3. λ噬菌体的主要类型 (1)插
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