实时荧光定量PCR技术的原理及应用分析.pptVIP

实时荧光定量PCR技术的原理及应用(Real time Quantitative PCR ) 何谓PCR 简单的说，PCR就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内?(In?Vitro)?的大量合成。 基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制.  PCR的要素 要被复制的DNA模板? 界定复制范围两端的引物? DNA聚合酶 合成的原料及水。 PCR的反应的三个主要步骤 变性，将双股的DNA加热后转为单股DNA以做为复制的模板.? 复性 是令引物于一定的温度下附着于模板DNA两端。? 延伸 在DNA聚合酶的作用下进行引物的延长及另一股的合成。 实时荧光定量PCR原理 实时荧光定量PCR的几种方法介绍 实时荧光定量技术的应用 实时荧光定量PCR定义 在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法 实时荧光定量PCR 原理----------实时原理 常 规 PCR技术： 对PCR扩增反应的终点产物进行定量和定性分析。 无法对起始模板准确定量，无法对扩增反应实时检测。 实时定量PCR技术： 利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化。 通过Ct值和标准曲线的分析对起始模板进行定量分析 实时荧光定量PCR原理----------定量原理 如何对起始模板定