不同脱钙条件对骨组织免疫组织化学染色抗原性的影响浅析.docVIP

不同脱钙条件对骨组织免疫组织化学染色抗原性的影响浅析 　　【摘要】 目的 分析不同脱钙条件对骨组织免疫组织化学（免疫组化）染色抗原性的影响。方法 用8%硝酸分别于微波、光波及光波+微波组合Ⅰ、光波+微波组合Ⅱ的条件下对骨组织进行脱钙， 并将室温（20℃）条件下脱钙的骨组织作为对照组， 运用链霉菌素卵白素-生物素（LSAB）免疫组化染色技术， 并对其染色效果进行分析比较。结果 微波、光波、光波+微波组合Ⅰ及光波+微波组合Ⅱ的脱钙时间显著低于对照组， 且免疫组化染色效果显著优于对照组（P0.05）。结论 光波+微波组合脱钙时间要明显短于微波、光波及室温脱钙， 且具有良好的免疫组化染色效果。 　　【关键词】 脱钙条件；骨组织；免疫组织化学染色；抗原性 　　【Abstract】 Objective To analyze influence by different decalcification conditions on bone tissue antigenicity in immunohistochemical staining. Methods Decalcification was made through 8% nitric acid under microwave， light wave， light wave + microwave Ⅰ and light wave + microwave Ⅱ in bone tissue. Decalcification under room temperature （20℃） was taken as control group. Labelled streptavidin biotin method （LSAB） immunohistochemical staining was applied to analyze and compare stain effects. Results Decalcification time under microwave， light wave， light wave + microwave Ⅰ and light wave + microwave Ⅱ were all shorter than control group， and their immunohistochemical staining effects were all better than control group （P0.05）. Conclusion Light wave + microwave provides shorter decalcification time than microwave， light wave and room temperature， and it contains good immunohistochemical staining effect. 　　【Key words】 Decalcification condition； Bone tissue； Immunohistochemical staining； Antigenicity 　　目前， 免疫组化染色技术是临床病理鉴别及诊断的重要手段， 骨组织由于含有丰富的钙盐， 因此其免疫组织化学染色自然与常规石蜡切片有所区别， 通常需要先去除钙盐后才可制成比较薄的切片， 然后再进行常规脱水、透明处理等操作[1]。本研究旨在分析探讨不同脱钙条件对骨组织免疫组化染色抗原性的影响， 现报告如下。 　　1 材料与方法 　　1. 1 材料 选取2012年4月～2015年8月骨外科送检的人骨组织， 脱钙液为硝酸10 ml+蒸馏水190 ml制成的硝酸液。Panasonic NN-DF382M光波/微波炉1台， 微波额定输入功率为1400 W， 光波额定输入功率为1050 W， 微波额定输出功率为900 W， 额定输出频率为2450 MHz， 输出功能共分为微波、光波及光波+微波组合Ⅰ、光波+微波组合Ⅱ。微波输出功率为5个调节档， 光波输出功率为单一光波管发光， 光波+微波组合Ⅰ为微波输出时间的30%+光波输出时间的70%， 光波+微波组合Ⅱ为微波输出时间的55%+光波输出时间的45%。 　　1. 2 方法 将1.0 cm×0.5 cm×0.3 cm的骨组织分别用8%硝酸分别于微波、光波及光波+微波组合Ⅰ、光波+微波组合Ⅱ的条件下进行脱钙。将脱钙后的骨组织常规制成切片， 经复合酶消化石蜡切片后， 运用LSAB免疫组化进行免疫酶细胞化学染色。 　　1. 3 统计学方法 采用SPSS19.0统计学软件处理数据。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验；计数资料以率（