幽门螺杆菌液体培养良方法的研究.docVIP

幽门螺杆菌液体培养改良方法的研究 摘要：采用烛缸培养，模拟微需氧条件，通过单因子试验统计分析，探讨不同因素对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp )生长的影响，改良了适于幽门螺杆菌液体培养的方法。结果表明，在适宜的烛缸培养条件下，Hp能够在添加β-环状糊精的布氏肉汤中很好地生长。 关键词：幽门螺杆菌，液体培养，烛缸法 幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp ) 已被证实是慢性胃炎及消化性溃疡的主要病因, 且与胃癌的发生密切相关。Hp培养是研究Hp的基本方法之一。传统方法都是采用固体培养，存在着环境要求高，所获菌量少，费时费力等诸多缺陷。为了深入研究Hp的致病机制，分析毒力相关蛋白，必须实现幽门螺杆菌的液体培养以获取大量Hp菌体，并为下一步开展Hp的蛋白质组学研究和疫苗学研究奠定基础。本实验通过对传统的烛缸法以及磁力搅拌加以改良创新进行摇菌液体培养，并筛选几种比较适合Hp液体培养的培养基，对其他几个可能影响培养效果的因素加以探索，动态测定OD600、菌体湿重和染色观察液体培养的产量和对Hp形态的影响。 1 材料与方法 1.1 菌种 幽门螺杆菌临床株T119、N76 均由我室从临床胃病患者的胃镜活检组织分离培养所得, 经染色、脲酶试验以及PCR 鉴定, 液氮保存。胃镜标本来自我校附属第一医院胃镜室。国际标准株NCTC11637，J99购自