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DNA的粗提取和鉴定
一、DNA的粗提取的原理
思考1：DNA存在于真核生物细胞的哪些部位？
思考2：提取生物大分子的一般思路是什么？
1、DNA的性质：
①DNA和蛋白质的溶解性、对酶、高温和洗涤剂的耐受性
在NaCl溶液中的溶解度 对蛋白酶的耐受性
在酒精中的溶解度 对高温的耐受性 对洗涤剂的耐受性 DNA 画出曲线图：
蛋白质 2、分析教材中DNA粗提取时去除滤液中的杂质的方案一、二、三的原理。
方案一：
方案二：
方案三：
二、DNA粗提取的主要步骤：
1、材料选择：
适于作实验材的材料：选用 的生物材料；如鸡（红）血，其适宜作为实验材料的原因：①鸡血（红）细胞核的DNA含量丰富，材料易得；②鸡血细胞极易吸水胀破。
一般用鸡血细胞液，而不用鸡全血，为什么？能否用哺乳动物红细胞呢？
2、主要实验步骤（以鸡血红细胞为例）：
思考：1.上述步骤都有搅拌的操作，搅拌操作有什么要求？为什么要这样做？
2.上述步骤都有过滤，过滤所用的材料是什么？每次过滤后选取滤液还是粘稠物？
3．本实验中两次加入蒸馏水的目的各是什么？
第一次：向鸡血细胞液中加入蒸馏水，目的：
第二次：向溶解DNA的2mol/LNaCl溶液中加入蒸馏水，目的：
拓展：1、以菜花为材料进行实验时，如何获得核物质？
取材、剪碎→加入洗涤剂、食盐→研磨、过滤
▲加洗涤剂的目的：
▲加入食盐的目的：
2、探究不同方法、洗涤剂、食盐用量对DNA粗提取量的影响（说说实验思路）
三、DNA的鉴定：
1、DNA鉴定的原理：
在 的条件下,DNA遇 会被染成 。
2、画出装置图，并标出每支试管中所加入的物质种类、总量、及出现的颜色。
3、在沸水浴中加热的目的是什么？同时说明DNA对高温的耐受性如何？为何要待试管冷却后比较颜色变化？
4、二苯胺试剂的使用与斐林试剂的使用有一些相似之处，试举例说明。
四、实验结果分析与评价
1、实验结果评价：是否提取到DNA？
①观察提取的DNA如果不是白色丝状物，说明DNA中的杂质较多；二苯胺鉴定出现蓝色说明实验基本成功，如果不呈现蓝色，可能所提取的DNA含量低，或是实验操作中出现错误，需要重新制备。实验提取的DNA粗制品有可能仍然含有核蛋白、多糖等杂质。以菜花为实验材料进行DNA的粗提取
将新鲜菜花和体积分数为95％的乙醇溶液放入冰箱冷冻室24 h提取DNA的具体步骤
1、取材? 称取30 g菜花，去梗取花，切碎。
2研磨? 将碎菜花放入研钵中，倒入10 mL研磨液，充分研磨10 min。3、过滤? 在漏斗中垫上尼龙纱布，将菜花研磨液过滤到烧杯中(有条件的学校可将滤液倒入塑料离心管中进行离心，用1000 r/min的转速，离心2～5 min，取上清液放入烧杯中)。在4 ℃冰箱中放置几分钟后，再取上清液。
4沉淀? 将一倍体积的上清液倒入两倍体积的体积分数为95％的预冷乙醇溶液中，并用玻璃棒缓缓、轻轻地搅拌溶液(玻璃棒不要直插到烧杯底部)。沉淀3～5 min后，可见白色的DNA絮状物出现。用玻璃棒缓缓旋转，将絮状物缠绕在玻璃棒上。
六、
8．（多选）下表是关于DNA粗提取与鉴定实验中所使用的材料、操作及其作用的表述．正确的是 试剂 操作 作用 A 柠檬酸钠溶液 与鸡血混合 防止血液凝固 B 蒸馏水 与鸡血细胞混合 保持细胞形状 C 蒸馏水 加入到溶解有DNA的NaCl中 析出DNA丝状物 D 冷却的酒精 加入到过滤后DNA的NaCl中 产生特定的颜色反应 猕猴桃DNA粗提取与鉴定实验
A．直接向剪碎的猕猴桃果肉组织中加入蒸馏水并搅拌，以释放核DNA
B．向猕猴桃果肉研磨液中加入适量的蒸馏水，以降低
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