对大脑皮层形态学改变的实验.pptVIP

一氧化碳中毒动物模型复制和形态学技术实验 形态学中心实验室 贾雪梅  石 蜡 包 埋 技 术  1、熟悉石蜡包埋技术基本过程  目的和要求 在显微镜下要观察人体组织，必须将组织切成以微米为单位的薄片，使其透光并易于观察，但直接切取柔软组织是难以办到的。 原 理 石蜡包埋法是将“支持物质”----石蜡渗入组织内部，为此，必须先将组织中水分除净，用酒精进行脱水(70％→80％→90%→95%→l00％)。再用二甲苯置换出组织中的酒精，使其透明，然后放入融化的石蜡中。将浸蜡的组织块置于包埋框中，冷却后组织块便具有石蜡的硬度，切片机便能将组织切成薄片。 操作步骤 1. 取材 直接取材或灌注后取新鲜组织 （不超过6h），切成3×5×2mm小块。 2. 固定 保持细胞原有形态和结构，解决组织 自溶问题。10%中性甲醛、4%多聚甲醛等。 3. 冲洗 自来水流水冲洗， 目的：停止固定液 对组织的作用，去除固定液，以免影响染色。 4. 脱水 通常多用酒精脱水，为减少组织收缩，脱水酒精的浓度由低浓度开始，逐级升高浓度。  60% (1h)→70% (1h)→80%酒精(1h)→ 90% (1h)→95%(2h)→ 100 %(