第十三章甾体激素类药物精选.ppt

3.讨论 反应速度 （1） C3 O ＞ C17 O 、 C20 O C11 O 不反应 反应专属性 C3－酮基 （2）溶剂的选择 异烟肼盐酸盐→甲醇、乙醇 无水甲醇 无水乙醇 （3）水分、O2与光线的影响 含水量↑→腙水解↑→A↓→%↓ 不挥发溶剂、不吸收水分时→ O2与光线无影响 酸、异烟肼的量 3 盐酸 : 异烟肼 2 : 1 样品 : 异烟肼 1 : 8 →ν↑ 酸度↑→ 异烟肼盐↓ 酸度↓→ A↓ 温度 4 t℃ ↑ → ν↑ 1. 原理 λmax 465 λmax 515 雌激素 Kober反应比色法 △ △ 雌二醇-3-甲醚 λmax 465 λmax 515 铁－酚试剂 [ NH4 2Fe SO4 2 + H2SO4 + H2O2 + 苯酚] * 铁盐的作用 加快黄色产物的形成、转化 加强红色产物的稳定性 * 酚的作用 加快红色产物的形成 消除反应产生的荧光 Iron-phenol Reagent 2. 特点： 优点 较高的灵敏度 具有一定的选择性 缺点 非化学计量反应 反应应控制条件 注意平行原则 （三）HPLC法 USP、BP、JP均采用 RP－HPLC（大多内标法） 特点 用样量少，灵敏度高，分离效 果好，测定速度快 （甾体激素类药物常含有结构相似的其他甾体杂质，对利用结构特征设计的比色法有干扰） 方法 官能团 对象 紫外 △4-3-酮，△1，4-3-酮 肾上腺皮质激素 芳香A环，酚羟基 雌、雄激素，避孕药 四氮唑 17位?-醇酮基 肾上腺皮质激素 异烟肼 △4-3-酮，△1，4-3-酮 肾上腺皮质激素 雄激素，孕酮 铁-酚 酚羟基 雌激素 2，4-二 △4-3-酮，△1，4-3-酮 肾上腺皮质激素 硝基苯肼 C20酮基硝基苯肼 雄激素，孕酮 苯肼 17、21-二羟基-20酮基 肾上腺皮质激素 硝酸银- 乙炔基 含乙炔基 氢氧化钠 结构与含量测定总结 练 习 题 1.甾体激素类药物的结构中能和四氮唑盐发生显色反应的基团 A. 酚羟基 B. 活泼次甲基 C. 甲酮基 D. C17 -α-醇酮基 E. 酮基 2. 用异烟肼比色法测定甾体激素药物含量时，其溶液的环境是 A．强酸性 B．中性 C．强碱性 D．弱碱性 E．以上都不对 问题3～7 A．维生素B1 B．醋酸地塞米松 C．两者皆是 D．两者皆不是 3. 异烟肼比色法 4. 硫色素反应 5. 紫外分光光度法 6. 羟肟酸铁反应 7. 绿奎宁（Thaciaquin）反应 B A C D D 8.可用于氢化可的松鉴别的试剂有 A．氨制硝酸银 B．异烟肼 C．红四氮唑 D．硫酸 E．重氮苯磺酸 9.能与亚硝基铁氰化钠反应生成兰 紫色的药物是 A．雌二醇 B．黄体酮 C．醋酸可的松 D．苯丙酸诺龙 E．以上都不对 10. 各国药典对甾体激素类药物 常用HPLC或GC法测定其含量，主要原因是 A. 它们没有特征紫外吸收，不能用 紫外分光光度法 B. 不能用滴定分析法进行测定 C. 由于“其它甾体”的存在，色谱法 可消除它们的干扰 D. 色谱法比较简单，精密度好 E. 色谱法准确度优于滴定分析法 11. 黄体酮在酸性溶液中可与下列哪些试剂反应呈色 A. 2,4-二硝基苯肼 B. 三氯化铁 C. 硫酸苯肼 D. 异烟肼 E. 四氮唑盐 12.用四氮唑比色法测定皮质激素类 药物，是利用C17 –α醇酮基的何种性质 A．氧化性 B．还原性 C．可加成性 D．酸性 E．碱性 * 样品要通过前处理，除去辅料的干扰后才进行鉴别试验。 * 提问可采用什么方法来提高甾体激素类药物的分光光度活性。 原理： 方法： 检查 游离磷酸 地塞米松磷酸钠 精密称取本品20mg，置25ml量瓶中，加水15ml溶解，精密加钼酸铵硫、酸试液2.5ml与1-氨基-2-萘酚-4-磺酸溶液1ml，加水至刻度，摇匀，在20℃放置30～50分钟，照分光光度法，在740nm处测定吸收度，与对照液4.0ml同法处理的吸收度比较，不得更大。 （对照液 0.0035%KH2PO4） （三）甲醇和丙酮 （灵敏度法） 甲醇 不得出峰 检测限 3.1ng 丙酮 ≤5.0% 内标法 + 校正因子 GC法 地塞米松磷酸钠 检查 甲醇和丙酮 精密称取本品0.16g，置10ml量瓶中，精密加内标溶液2ml，加水稀释至刻度，作为供试液；另精密量取甲醇10μl ≈7.9mg 与丙酮100μl ≈79mg 置100ml量瓶中，精密加内标溶液20ml，加水至刻度，作为对照液。照气相色谱法测定，含丙酮不得过5.0%，并不得出现甲醇峰。 炔雌醇 （四）雌酮 原理 Zimme