第三节蛋白质工程分解.pptVIP

三、蛋白质工程的应用 　 蛋白质工程汇集了当代分子生物学等学科的一些前沿领域的最新成就，它把核酸与蛋白质结合、蛋白质空间结构与生物功能结合起来研究。蛋白质工程将蛋白质与酶的研究推进到崭新的时代，为蛋白质和酶在工业、农业、医药和环境保护等方面的应用开拓了诱人的前景。蛋白质工程开创了按照人类意愿改造、创造符合人类需要的蛋白质的新时期。 1、改造酶结构，有目的地提高酶的热稳定性和催化活性 2、生物制药——“鼠—人嵌合抗体”、“对t-PA的改造” 3、疾病诊断：利用蛋白质芯片检测与诊断SARS病毒 异亮氨酸 苏氨酸 天门冬酰胺 天门冬酰胺 酵母菌 丙糖磷酸异构酶 热稳定性提高50％ 工业生产上 三、蛋白质工程的应用 1、改造酶结构，提高酶的热稳定性 实例： 鼠抗体 人抗体 恒定区 恒定区 可变区 可变区 嵌合抗体 对人体的不良反应减少 制药领域上 2、鼠—人嵌合抗体 3.对t-PA的改造”：纤维蛋白溶解酶原激活因子中的天门 冬酰胺替换为谷氨酰胺延长了其在血 液循环中的停留时间 4、蛋白质芯片检测与诊断SARS病毒（阅读） 蛋白质工程使我们不仅能更充分地利用自然界存在的基因和蛋白质，而且能够在分子水平上对基因和蛋白质进行再设计和改造，进而创造出自然界不存在的 基因和蛋白质。当然，蛋白质工程中还有许多理论和技术问题有待研究和探索，但是 我们可以相信，蛋白质工程的发展前景一定非常广阔！ 过程 结果 联系 目标 操作核心 操作起点 蛋白质工程 基因工程 项目 目的基因 预期的蛋白质功能 基因表达载体 基因 获取目的基因→ 构建表达载体→ 导入受体细胞→ 目的基因的检测与表达 预期蛋白质功能→ 设计蛋白质结构→ 推测氨基酸序列→ 推测核苷酸序列→ 合成DNA →表达出蛋白质 定向改造生物的遗传特性，获得人类所需的生物类型或生物产品 定向改造或生产人类所需的蛋白质 生产自然界中已有的蛋白质 蛋白质工程是在基因工程的基础上,延伸出来的第二代基因工程。因为对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白质，必须通过基因的修饰或基因的合成。 生产自然界没有的蛋白质 1 ．关于生物体内存在的天然蛋白质，下列说 法不正确的是（ ） A．是生物在长期进化过程中形成的 B．它们的结构和功能符合特定物种生存的需要 C．构成天然蛋白质的氨基酸目前发现的有20种 D．一定完全符合人类生产和生活的需要 D 习 练 馈 反 2．蛋白质工程中直接需要进行操作的对象是 Ａ．氨基酸结构 B．蛋白质空间结构 C．肽链结构 D．基因结构 Ｄ * * 蛋白质工程崛起的缘由 1、基因工程的应用 （1）基因工程的实质： 将一种生物的基因转移到另一种生物体内，使后者产生本不能产生的蛋白质，进而表现出新的性状。 在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质。 （2）基因工程的不足： 蛋白质工程崛起的缘由 1、基因工程的应用 2、天然蛋白质的不足 天然蛋白质是生物在长期进化过程中形成的，它们的结构和功能符合特定物种生存的需要，却不一定完全符合人类生产和生活的需要。 蛋白质工程崛起的缘由 1、基因工程的应用 2、天然蛋白质的不足 3、蛋白质工程的目的 生产符合人类生产和生活的需要的蛋白质。 满足人类生产和生活的需要 例如： 改造 干扰素（半胱氨酸） 体外很难保存 干扰素（丝氨酸） 体外可以保存半年 干扰素是一种抗病毒、抗肿瘤的药物。将人的干扰素的cDNA在大肠杆菌中进行表达，产生的干扰素的抗病毒活性为106 U/mg，只相当于天然产品的十分之一，虽然在大肠杆菌中合成的β-干扰素量很多，但多数是以无活性的二聚体形式存在。为什么会这样？如何改变这种状况？研究发现，β-干扰素蛋白质中有3个半胱氨酸（第17位、31位和141位），推测可能是有一个或几个半胱氨酸形成了不正确的二硫键。研究人员将第17位的半胱氨酸，通过基因定点突变改变成丝氨酸，结果使大肠杆菌中生产的β-干扰素的抗病性活性提高到108 U/mg，并且比天然β-干扰素的贮存稳定性高很多。 满足人类生产和生活的需要 又如： 玉米中赖氨酸含量比较低 天冬氨酸激酶 （352位的苏氨酸） 二氢吡啶二羧酸合成酶（104位的天冬酰胺） 天冬氨酸激酶 （异亮氨酸） 二氢吡啶二羧酸合成酶（异亮氨酸） 玉米中赖氨酸含量可提高数倍 改造 改造 一、蛋白质工程的概念 1.概念: 蛋白质工程是指通过物理化学与生物化学等技术了解蛋白质的结构和功能，并借助计算机辅助设计、基因定点诱变和重组DNA技术改造基因，以定向改造天然蛋白质，甚至创造自然界不存在的蛋白质的技术。 基因工程是其中的关键技术,蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。 基础: 实质： 途径: 目标: 了解蛋白质的结构和功能的关系 基因修饰或基因合成