第十五章人类疾病动物模型复制可研报告.doc

第十五章 人类疾病动物模型复制 ? 第一节 概述 ? 由于人类疾病的复杂性，医学研究中必须对疾病过程进行各种观察、分析和实验。这些工作大多不可能在人体上进行，必须借助于适当的动物及其器官、组织和细胞进行研究。供医学研究用的这些动物具有与所研究的人类疾病相似的特点，故称之为人类疾病动物模型(animal models of human diseases)。人类疾病动物模型通常可以通过人工诱发，或选择具有相应特点的自然动物而获得。 人类疾病动物模型通常依照研究目的而设计，不同的研究选用的动物模型可有很大差别，所以人类疾病动物模型很多，也很复杂。许多人类疾病的动物模型可以自然获得，即利用动物自发性的遗传特性或通过育种手段培育遗传特性建立而成，如裸鼠、肥胖症小鼠、自发性高血压鼠、自发性高胆固醇血症鼠等。 更多的人类疾病实验动物模型是用人工方法，将致病因素作用于动物，诱发动物特定器官、组织、细胞或全身的损害，造成与所研究的人类疾病相似的机能、代谢和形态学的改变。可用于诱发疾病模型的方法和因素很多，包括物理因素、化学因素、微生物因素以及基因工程技术等。 近年随着生物技术的发展，越来越多地应用生物工程技术方法制作动物模型，包括利用动物卵或胚胎移植、胚胎嵌合、细胞核移植、转基因或基因敲除和克隆等技术制作人类疾病的动物模型。 复制的人类疾病动物模型是否能真正地、客观地反映人类疾病是能否作为研究对象而用于医学研究的关键。但动物与人类之间存在着很大的差异，任何一种人类疾病的动物模型不可能与人类疾病完全相同，而且影响因素很多，所以在选择和设计动物模型时要尽可能力求全面周密，在分析实验结果时要充分考虑动物模型的局限性。 复制人类疾病动物模型有三点最基本的要求：一是复制模型选用的动物应尽可能接近人类，建立的模型必须尽可能地与所研究的人类疾病有相同的或相近的机能、代谢和形态学变化特点，病变发生机理应尽量与相应的人类疾病相同；二是选用的方法要保证疾病动物模型复制有较高的成功率，具有较好的可重复性和一定的稳定性，以供他人应用和验证；三是复制成功的动物模型应有明确而可靠的测量或观察的指标，以供判断病变的轻重程度和病程的缓急。 应该强调指出的是，动物模型的设计和选择都要适合于研究的目的，即便研究同一疾病，但因研究的发病环节不同也不可套用同一动物模型。 本章节选择性的介绍几种严重威胁人类生命的疾病和综合征的动物模型复制方法，供学生在探索性实验阶段参考。 ? 第二节 动脉粥样硬化模型 ? 动脉粥样硬化（Atherosclerosis, AS）性疾病是目前危害人类健康的“头号杀手”，动脉粥样硬化斑块的形成最常见于大、中动脉。动脉粥样硬化斑块的发生发展过程大致如下：由于血浆脂质水平的升高或同时有其他危险因子的存在，使动脉内皮发生了某种损伤性变化，使血浆脂质易于通过动脉内膜进入内膜下间隙并沉积。同时血流中的单核细胞易与内皮细胞发生粘附，并通过内皮细胞间隙跨过内皮进入内皮下，摄取大量脂质而转化成泡沫细胞，形成脂质条纹，随后血管平滑肌细胞向内膜方向迁移，并摄入脂质和合成大量细胞间质，导致动脉粥样硬化斑块形成。 AS研究领域中经常使用动物模型作为实验对象，获得大量实验结果，大大促进了人们对AS的认识。本节主要介绍实验性动脉粥样硬化动物模型和泡沫细胞模型的复制方法。 ? 一、动脉粥样硬化动物模型的复制 （一）家兔 家兔是复制动脉粥样硬化模型最常用的动物，它对外源性胆固醇的吸收率高，可达75～95%，静脉注入胆固醇后高脂血症可持续3～4天。只要给兔含胆固醇较高的饲料，不必附加其它因素，经3～4月即可形成明显的动脉粥样硬化病变，而且与人体发生的病变相似，取血检查也较方便。 通常选用体重2kg左右的新西兰白兔或日本大耳白兔，每天喂服基础饲料加胆固醇0.3g，4个月后肉眼可见主动脉粥样硬化病变；若每天胆固醇剂量增至0.5g，3个月后可出现病变；若增至每天1g，可缩为2个月。在基础饲料中加入15%蛋黄粉、0.5%胆固醇和5%猪油，经3周后，将饲料中胆固醇减去，再喂3周，可使主动脉病变发生率达100%，血清胆固醇可增高至2000mg%。 促进病变形成的方法： 1．在高脂饲料中还可加入甲基硫氧嘧啶、丙基硫氧嘧啶、甲亢平、苯丙胺、维生素D、烟碱或蔗糖等； 2．预先用Fogarty球囊导管插入主动脉，造成内皮细胞剥脱的浅表损伤，再喂高脂饲料； 3．静脉滴注去甲肾上腺素引起血管壁中层弹性纤维拉长、劈裂或断裂； 4．皮下注射同型半胱氨酸硫代内脂（dl-homocysteine thiolactone）可明显促进动脉粥样硬化病变。 （二）其他动物 除田鼠和地鼠外，一般温血动物只要用适当的方法，都能形成动脉粥样硬化的斑块病变。已经用于复制动脉粥样硬化模型的动物除兔以外，还有鸡、鸽 、猴 、猪等。