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1适用范围: 适用于由大豆制得的产品和副产品中尿素酶活性的测定。
2引用标准:AOCS Ba 9-58《脲酶活性》
3方法原理:试样与缓冲尿素溶液反应,使试样中的尿素酶分解尿素,释放出氨基氮,测定溶液的PH值,以PH值得增量表示。
4检验方法
4.1试剂仪器
仪 器 序号 仪器名称 规格 序号 仪器名称 规格 1 烧杯 100ml 3 粉碎机 孔径0.45mm(40目) 2 分析天平 感量0.0001g。 4 PH计 带有甘汞电极, 准确度在+0.02PH值范围之内 试 剂 序号 试剂名称 规格 序号 试剂名称 规格 1 尿素 分析纯 3 磷酸二氢钾 分析纯 2 分析纯 4 磷酸氢二钾 分析纯 注:1. 0.05M磷酸盐缓冲液:取分析纯KH2PO43.403g溶于蒸馏水,再取分析纯
K2HPO44.355g溶于蒸馏水,将这两种溶液的混合液后定容至1000ML,用酸 或碱 溶液调节PH值至7.0(调节时最好用PH计调节)。该缓冲液有效期90天。
2. 尿素缓冲液:取分析纯尿素15克,溶于磷酸盐缓冲液500ML。调整该溶液的PH值至7.0。
4.2 试样制备: 取具有代表性的试样,粉碎至40目。用四分法缩减至200g,装于密封容器。防止试样的成分变化或变质。
4.3 分析步骤:
将试样粉碎到至少60%过40目筛 0.45mm以下 ,分别称取两份0.800克的样品于2个烧杯中,其中一个加40ml尿素缓冲液,另一个加入40ml磷酸盐缓冲液做空白试验;摇匀后放入30±0.5℃的恒温水浴锅槽中,每5分钟摇匀一次,反应30分钟后,在5分钟内测定两个试管中溶液的PH值。
4.4 结果计算: 尿素酶活性指数(PH值上升值) 试样的PH测定值-空白的PH测定值
4.5 允许差值: 对蒸熟和未蒸熟的产品,同一实验室的双试验结果允许差为0.03和0.10PH单位,不同实验室之间的允许差分别为0.05和0.15PH单位。
5 注意事项: 必须及时清洗甘汞电极,短时间内可以放在蒸馏水中。长时间不用时必须放在KCL溶液中保护电极。
文件类型 质量管理体系文件 文件名称 版 本 号 A 文件编号 BNP-WI-QA-C08 豆粕尿素酶检测方法 生效日期 2008-8-25 部 门 品控部 页 码 2 / 2
编制 王艳丽 审核 范光华 批准 刘乾松 日期 2008-8-16 日期 2008-8-20 日期 2008-8-22
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