常用液相色谱柱保养要点.ppt

用95%水-5%乙腈以1.0ml/min流速冲洗约10倍柱体积→再用 THF（四氢呋喃）以0.5ml/min流速冲洗约10倍柱体积→再用95%乙腈-5%水以1.0ml/min流速冲洗约10倍柱体积→保持95%乙腈-5%水继续冲洗，以低流速0.2～0.5mL/min冲洗过夜→流动相平衡2h（若流动相含有缓冲盐，需先用与流动相同比例的水-有机相以1.0ml/min流速冲洗约30min），进样检测即可。 3.3阴/阳离子交换柱（negion/cation exchange column） 3.3.1阳离子交换柱常见故障与处理：离子交换柱属于较脆弱的色谱柱，阳离子交换柱在使用过程中，往往会由于不规范操作而导致一系列故障。常见故障如下： ①柱压升高伴随柱效降低：主要是由于系统管路或柱保存过程中柱内或长菌、样品溶液中的颗粒物积聚在烧结物或者柱床上等所致。 ②色谱峰额外地展宽：主要是由于管路太长、非新鲜配制的流 动相中含有不正确的阴离子、流动相pH与离子强度不正确、用流动相平衡时间不够等所致。 ③柱压正常伴随柱效降低：主要是由于样品中有脂肪，油脂，脂质等有机物致使固定相的表面被覆盖、从样品中带来的不确切的有机物或未正确制备洗脱液、在洗脱液制备完成以后带入洗脱液中的非特定有机物（eg.运输时从大气中带来）。 针对上述情况，在使用离子交换柱过程中需特别注意即可避免。若已经产生故障，可根据实际情况