动物细胞融合与单克隆抗体上课用.pptVIP

温故而知新——植物细胞杂交（马铃薯番茄） ５、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 * 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 融合的原生质体AB 再生出细胞壁 植物细胞的融合 杂种细胞AB 杂种植株 脱分化 愈伤组织 再分化 植物组织培养 原生质体B 原生质体A 去 壁 去 壁 人 工 诱 导 植物细胞A 植物细胞B 三、动物细胞融合 1.概念： 动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 融合后形成的具有两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。 2、动物细胞融合基本原理： 与植物原生质体融合的基本原理相同，即细胞膜的流动性 3、诱导方式 物理法： 化学法： 生物法： 灭活的病毒 电激、振动、离心 聚乙二醇（PEG） 例如：仙台病毒 灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面 细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接 细胞融合，形成杂种细胞 （细胞膜具有一定的流动性） 生物法： 灭活的病毒 （丧失感染性、保留抗原结构） ４.过程： 制备单克隆抗体 用途 诱导方法 细胞融合的方法 细胞融合原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 获得杂种植株 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 细胞的全能性 去除细胞壁后诱导原生质体融合 使细胞分散后诱导细胞融合 物理（离心、振荡、电刺激） 化学（聚乙二醇） 物理、化学方法（同左） 灭活的病毒 ６、动物细胞融合技术的发展简史告诉我们：科学技术是不断发展的。那么，实现动物细胞融合有什么意义呢？ 打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能； 广泛应用多个学科领域； 重要用途：制备单克隆抗体。 四、单克隆抗体 自主阅读P52：传统的抗体的生产方法及缺陷是什么？ 　１．B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生特异性抗体。 　２．动物在免疫反应过程中，体内产生特异性抗体种类可达百万种以上，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。 　３．但每一个Ｂ淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。　 　４、在体外，一个Ｂ淋巴细胞是不可能无限增殖的。　 产量低、纯度低；而且制备抗体特异性差。 分析： B淋巴细胞与抗体的关系 １、单克隆抗体McAb（概念） 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 　　那么，如何大量获得化学性质单一、特异性强的抗体？（即单克隆抗体）　 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖 杂种细胞 动物细胞培养技术 ２、设计方案： 动物细胞融合 创始人：米尔斯坦 单克隆抗体 既能产生特异性抗体，又能大量繁殖 二、单克隆抗体 抗体由什么细胞产生？ 效应B淋巴细胞 每个效应B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体 要想获得大量的单一抗体，必须克隆单一的B淋巴细胞，形成细胞群 1975，米尔斯坦和柯勒 杂交瘤技术 1、原理：杂交瘤细胞具有两个亲本的特性，即能迅速大量增殖，又能足够数量的单一抗体。 2、过程 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 诱导融合 B-B细胞 B-瘤细胞 瘤-瘤细胞 选择培养 杂交瘤细胞（ B-瘤细胞） 克隆化培养 抗体检测 杂交瘤细胞 体外培养 小鼠腹腔内增殖 单克隆抗体 3.单克隆抗体的应用： 单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高、产量大 ①作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质，并与特异性结合 优点：准确、高效、简易、快速 ②用于 运载药物：制成“生物导弹” 治疗疾病：主要用于癌症治疗 一种诱导细胞融合的新方法 一种新细胞 灭活病毒 杂交瘤细胞 一个优势 单克隆抗体特异性强、灵敏度高、产量大的优势 主要用于制备 单克隆抗体 获得杂种植株 用途 物理、化学方法 （同左） 灭活的病毒 物理（离心、振动、电刺激） 化学（聚乙二醇） 诱导方法 使细胞分散后诱 导细胞融合 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 细胞融合的方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性、 植物细胞全能性 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 植物、动物细胞融合的比较 1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓疤细胞融合的是（ ） 　 A.经过免疫的B淋巴细胞 B.没经过免疫的T淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的Ｂ淋巴细胞 A *