《微生物学教学课件》第六章 微生物的生长及其控制.pptVIP

各位同学：以此版本为准，请互相转告。祝考试成功！ 第六章 微生物的生长及其控制 第一节 测定生长繁殖的方法 第二节 微生物的生长规律 第三节 影响微生物生长的主要因素 第四节 微生物培养法概论 第五节 有害微生物的控制 第六章 微生物的生长及其控制 第一节 测定生长繁殖的方法 第二节 微生物的生长规律 第三节 影响微生物生长的主要因素 第四节 微生物培养法概论 第五节 有害微生物的控制 地球估计有4-6 x1030个原核生物细胞 Bacteria 微生物的生长繁殖 生长 growth: 同化(合成)作用的速度超过异化(分解)作用 -原生质总量(体积和重量)不断增加 繁殖 reproduction: 这种平衡生长达到一定程度后将会引起个体数目的增加 微生物个体和群体的关系 个体生长 -个体繁殖 -群体生长 (population growth*) (群体生长 = 个体生长 + 个体繁殖) 研究微生物生长繁殖规律的意义: 研究微生物生理、生化和遗传等的重要指标, 生产实践上的应用或有害微生物防治 测定生长繁殖的方法 测生长量: 基于原生质含量增加的原理 直接法 (测体积或干重) 间接法 (比浊法 A450-650 nm、生理指标如含氮/碳/磷量, DNA, RNA, ATP..) 测定生长繁殖的方法 计繁殖数 (计算个体数目) 直接法: 利用计数板在光学显微镜下直接观察细胞并进行计数(总菌数) -活菌染色 vital staining: 酵母菌的美蓝染色, 细菌丫啶橙染色 间接法 (活菌计数法 viable cell counting): 原理是活菌生长使液体培养基变浑浊或在固体培养基上形成菌落 平板菌落计数法 plate colony counting: 稀释菌液-浇注平板或涂布平板 -菌落形成单位 cfu 亨盖特滚管技术 (Hungate roll-tube technique): 用于厌氧菌菌落计数 测定生长繁殖的方法 直接计数法的优缺点 快速简便，还可知细胞的形态特征 不适于对运动细菌的计数 不能区分死菌与活菌 个体小的细菌在显微镜下难以观察 需要相对高的细菌浓度 测定生长繁殖的方法 直接计数法的优缺点 … 当样品中菌数很低时, 可将一定体积的水样通过膜过滤器, 然后将滤膜干燥、染色, 并经处理使膜透明, 再在显微镜下计算膜上(或一定面积中)的细菌数 第六章 微生物的生长及其控制 第一节 测定生长繁殖的方法 第二节 微生物的生长规律 第三节 影响微生物生长的主要因素 第四节 微生物培养法概论 第五节 有害微生物的控制 微生物的个体生长和同步生长 个体生长 individual growth: 微生物细胞从小到大的生长过程 (以及随之发生的阶段性的极其复杂的生物化学变化和细胞学变化) 同步生长 synchronous growth: 通过同步培养技术使微生物群体中的各个个体处于分裂步调一致的生长状态* 环境条件诱导法: 氯霉素抑制蛋白质合成、细菌芽孢诱导发芽、藻类细胞的光照和黑暗控制.. 机械筛选法: 利用处于同一生长阶段细胞的体积、大小的相似性 (如Helmstetter-Cummings膜洗脱法) 机械筛选法获得同步生长细胞 Helmstetter-Cummings 法系最经典的获得同步生长的方法 原理：同一生长期细菌与膜结合牢固程度相当 由于细胞的个体差异,同步生长往往只能维持2-3个世代, 随后又逐渐转变为随机生长 单细胞微生物的典型生长曲线 生长曲线 growth curve: 定量描述液体培养基中微生物群体生长规律的实验曲线 典型生长曲线: 延滞期 指数期 稳定期和衰亡期 延滞期 lag phase 指少量单细胞微生物接种到新鲜培养液中后, 在开始培养的一段时间内, 因代谢系统适应新环境的需要, 细胞数目没有增加的一段时期 主要特点: 生长速率常数R为0 细胞形态变大或增长 (许多杆菌可长成丝状) 细胞内RNA尤其是rRNA含量增高 合成代谢活跃 (核糖体, 酶类及ATP) 对外界不良条件敏感 (盐浓度, 温度, 抗生素等) 延滞期 lag phase 影响延滞期长短的因素: 接种龄 (即接种物inoculum的生长年龄) 接种量 (与延滞期成反比, 发酵工业 1:10 v/v) 培养基成分 (营养丰富的天然培养基 vs 营养单调的组合培养基) 指数期 exponential phase 生长曲线中紧接着延滞期的一段细胞数以几何级数增长的时期 主要特点: 生长速率常数R最大 (代时或倍增时间最短) 平衡生长 balanced growth 酶系统活跃, 代谢旺盛 影响指数期微生物代时长短的因素: 菌种 (如E. coli 12.5-17 min, Bacillus subtilis 2