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实验实训八:植物组织水势的测定 三、用品与材料 指管木架、指形管(带软木塞)、弯头毛细吸管(带橡皮头)、小镊子、移液管、温度计、穿孔器、不同浓度的蔗糖液(0.2 ~ 0.6 mol/L)、甲烯蓝(亚甲基蓝)、叶片。 四、方法与步骤 1. 取洗净烘干的指形管10 个,分成两组,各按糖液浓度编记2、3、4、5、 6 号,插在指管架上,排成两排,使同号相对。在一排管中,分别注入0.2 ~ 0.6 mol/L的蔗糖液各5 ml;另一排管内分别注入对应浓度糖液各1 ml,两者管口均塞上软木塞。 2. 选取有代表性的植物叶子一至数片,用打孔器打取叶圆片40片。用小镊子把圆片放入1 ml糖液指形管中,每管8 片,再塞上软木塞。每隔数分钟轻轻摇动,使叶片要全部浸入糖液中,使叶内外水分更好地移动。 3. 30 ~ 60 min后,打开软木塞,向装叶的每一管中投人甲烯蓝小结晶1 ~ 2 粒 (可用针或火柴杆等挑取甲烯蓝粉少许,要求每管用量大致相等),摇动均匀,使糖液呈蓝色(便于观察)。 4. 用干净毛细管吸取有色糖液少许,轻轻插入同浓度5 ml糖液内,在糖液中部轻轻挤出有色糖液一小滴,小心抽出毛细吸管,不能搅动溶液,并观察有色糖液的升降情况,分别作下记录。毛细吸管不能乱用,一个浓度只能用一只,既要干净,又要干燥。 找出便有色糖液不动的浓度,即为等渗浓度。如果找不到静止不动的浓度,则可找液滴上升和下降交界的两个浓度,取其平均值,即可按公式计算出该植物的水势。 5. 计算根据找到的溶液浓度换算成溶液渗透压,可按下列公式计算 : φs = -P P = iCRT 式中 φs—溶质势; P—渗透压; i—渗透系数(表示电解质溶液的渗透压为非电解质溶液渗透压的倍数。如蔗糖i=1,NaCli = 1.8,KNO3i =1.69); C—溶液的摩尔浓度 ( 即所求的等渗浓度 ); R—气体常数 = 0.082; T—绝对温度,即实验时液温 +273。 所求得的P 值,即为该溶液的渗透压,用大气压表示,换算成 Pa(1大气压 =1.013 × 105 Pa),其负值即为该溶液的溶质势,也就是被测植物组织的水势(因植物组织处于等渗溶液中,组织的水势等于外液的溶质势)。 注意: 1. 蔗糖溶液用前一定要摇匀,时间放久了的蔗糖溶液会分层,影响结果。 2. 弯头毛细吸管要各个浓度专用。 五、作业 1. 记录实验结果。 2. 记录结果代入公式,算出植物组织水势。 表1:蔗糖溶液浓度与其渗透势 * * 一、目的 学会用小液流法来测定植物组织水势。 二、原理 当植物组织浸入外界溶液中时,若植物的水势小于外液的水势,则细胞吸水,使外液浓度变大;反之,植物细胞失水,外液浓度变小,若细胞和外液的浓度相等,则外液浓度不发生变化。溶液浓度不同其相对密度也不同,不同浓度的两溶液相遇,稀溶液相对密度小而会上升,浓溶液相对密度大而会下降。 若组织水势大于蔗糖水势 →组织失水 →蔗糖溶液变稀 →小液流上升 蔗糖溶液浓度(mol/L) 渗透势(大气压) 0.1 -2.64 0.15 -3.96 0.2 -5.29 0.25 -6.70 0.3 -8.13 0.35 -9.58 0.4 -11.11 0.45 -12.69 0.5 -14.31 0.55 -15.99 0.6 -17.77 0.65 -19.61 0.7 -21.49
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