培训课件--实时荧光PCR技术.ppt

原理方法 设计管理 标本处理 仪器设备 检验项目 加样器 核酸提取仪 扩增仪 测序仪 杂交仪 恒温干浴仪 冰箱 生物安全柜 离心机 原理方法 设计管理 标本处理 仪器设备 检验项目 仪器设备的维护与校准 实时荧光PCR技术 原理方法 设计管理 标本处理 仪器设备 检验项目 基因扩增仪器设备的管理 实时荧光PCR技术 仪器设备 质控方法 频度 失控标准 扩增仪 仪器校验实验 当仪器移动时 实验失败 热电偶检测温度 扩增功能检测 每月一次 每4个月一次 如靶温度或温度差异超出允许范围 待测孔未出现扩增，检测温度 加样器 校准 每年2次 不符合要求 水浴箱 温度检测 每次实验 不符合要求 原理方法 设计管理 标本处理 仪器设备 检验项目 HAV HBV HCV HIV 人乳头瘤病毒 巨细胞病毒 SARS-CoV EB病毒 流感病毒 沙眼衣原体 结核杆菌 淋病奈瑟菌 幽门螺杆菌 肺炎支原体 刚地弓形虫 解脲支原体 实时荧光PCR技术 实时荧光PCR技术 实时荧光PCR技术 教材分析 教法学法 教学过程 教学反思 教学效果 实时荧光PCR技术 教材分析 教法学法 教过程 教学反思 教学效果 实时荧光PCR技术 检验科 李长丕 临床基因扩增实验室技术人员再培训暨实验室技术人员上岗培训班（2013年3月13日至16日） 李金明 毕业于中国协和医科大学研究生院临床检验诊断学专业，获医学博士学位。现为卫生部临床检验中心临床免疫室主任，研究员，中国协和医科大学研究生院博士研究生导师。 PCR实验室的设计及质量管理 2 标本的采集、运送和保存 3 PCR的基本原理和方法 1 临床PCR检验仪器设备 4 PCR技术的检验项目 5 主要内容 原理方法 设计管理 标本处理 仪器设备 检验项目 实时荧光PCR技术的基本原理 实时荧光PCR技术 实时荧光定量PCR技术： 利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化，通过Ct值和标准曲线实现对起始模板的定量分析。 Real-time PCR仪 ABI7500 原理方法 设计管理 标本处理 仪器设备 检验项目 实时荧光PCR技术的常用方法 TaqMan 分子信标 蝎形探针 数 字 双杂交探针 双链DNA交联荧光染料 常用方法 实时荧光PCR技术 原理方法 设计管理 标本处理 仪器设备 检验项目 实时荧光PCR技术的常用方法 实时荧光PCR技术 TaqMan实时荧光定量PCR 原理方法 设计管理 标本处理 仪器设备 检验项目 实时荧光PCR技术的常用方法 实时荧光PCR技术 双链DNA（dsDNA）交联荧光染料实时荧光PCR 原理方法 设计管理 标本处理 仪器设备 检验项目 实时荧光PCR技术的常用方法 实时荧光PCR技术 分子信标实时荧光定量PCR 原理方法 设计管理 标本处理 仪器设备 检验项目 实时荧光PCR技术的常用方法 实时荧光PCR技术 双杂交探针实时荧光PCR 原理方法 设计管理 标本处理 仪器设备 检验项目 实时荧光PCR技术的常用方法 实时荧光PCR技术 蝎 形探针实时荧光PCR 原理方法 设计管理 标本处理 仪器设备 检验项目 实时荧光PCR技术的常用方法 实时荧光PCR技术 数字（Digital）实时荧光PCR 原理方法 设计管理 标本处理 仪器设备 检验项目 实验室认可预验收 3 Click to add title in here 2 Click to add title in here 2 实验室质量管理体系的建立 2 临床PCR实验室的标本接收及分区规划设计 1 实时荧光PCR技术 临床PCR实验室的设计及质量管理 原理方法 设计管理 标本处理 仪器设备 检验项目 应在四个测定区域之外的地方或区域内接收 接收的标本应收集在原始容器中 在核酸提取时带入至标本制备区 标本采集 血清分离 编号 保存或检测 一、标本接收要求 标本接收及分区规划设计 实时荧光PCR技术 原理方法 设计管理 标本处理 仪器设备 检验项目 什么样的PCR检验实验室是最标准的？ 标本接收及分区规划设计 实时荧光PCR技术 原理方法 设计管理 标本处理 仪器设备 检验项目 在标本接收区分离血清（浆）标本需要哪些设备呢？ 标本接收及分区规划设计 实时荧光PCR技术 原理方法 设计管理 标本处理 仪器设备 检验项目 标本接收及分区规划设计 二、实验室分区设计原则及工作流程 一般 原则 因地制宜 各区独立 方便工作 注意风向 （理想的PCR实验室设计） 产物分析区 空气流向 空气流向 空气流向 空气流向 缓冲间 缓冲间 缓冲间 专用走廊 工作流向 扩增区 标本制