病毒血凝实验报告.docVIP

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病毒血凝实验报告

病毒血凝实验报告 病毒的血凝及血凝抑制试验 病毒的血凝及血凝抑制试验 有些病毒具有凝集某种(些)动物红细胞的能力,称为病毒的血凝,利用这种特性设计的试验称血球凝集(HA)试验,以此来推测被检材料中有无病毒存在,是非特异性的,但病毒的凝集红细胞的能力可被相应的特异性抗体所抑制,即血球凝集抑制(HI)试验,具有特异性。通过HA-HI试验,可用已知血清来鉴定未知病毒,也可用已知病毒来检查被检血清中的相应抗体和滴定抗体的含量。 [目的要求] 掌握病毒HA和HI试验的原理和基本操作方法,了解其实用价值。 [材料与试剂] 1. 96孔“U”形或“V”形微量反应板,50?L定量移液器,滴头,微型振荡器。 2. 生理盐水,0.5% 鸡红细胞悬液。 3. 新城疫病毒液(尿囊液或冻干疫苗液),新城疫阳性血清,被检鸡血清。 [实验内容及操作方法] (一)血球凝集(HA)试验 1. 在96孔微量反应板上进行,自左至右各孔加50?L生理盐水。 2. 于左侧第1孔加50?L病毒液(尿囊液或冻干疫苗液),混合均匀后,吸50?L至第2孔,依次倍比稀释至第11孔,吸弃50?L;第12孔为红细胞对照。 3. 自右至左依次向各孔加入0.5% 鸡红细胞悬液50?L,在振荡器上振荡,室温下静置后观察结果(表4-1)。 表 4-1 病毒血凝试验的操作方法(单位:?L) 弃50 4. 结果判定:从静置后10 min开始观察结果,待对照孔红细胞已沉淀即可进行 结果观察。红细胞全部凝集,沉于孔底,平铺呈网状,即为100% 凝集(++++),不凝集者(-)红细胞沉于孔底呈点状。 以100% 凝集的病毒最大稀释度为该病毒血凝价,即为一个凝集单位。从表4-1看出,该新城疫病毒液的血凝价为1:128,则l:128为1个血凝单位,1:64、l:32分别为2、4个血

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