12基因工程的基本操作程序(学案).docVIP

课题：§1.2基因工程的基本操作程序 备课时间：2月22日 姓名： 班级： 小组： 【课标要求】 ①写出基因工程的四个操作步骤。解释基因文库、基因组文库、部分基因文库的区别与联系。 分析基因工程四个步骤的原理、工具及具体的操作程序。 II） 【教学重点】基因工程基本操作程序的四个步骤教学难点从基因文库中获取目的基因利用PCR技术扩增目的基因一．基因工程的基本操作程序： 基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤： 、 、、 。 一 目的基因的获取 1．目的基因： 。 2．获取目的基因的方法 1 从 中获取目的基因： 基因文库：基因组文库：含有一种生物的 基因 种类 cDNA文库：含有一种生物的 基因 目的基因的获取 根据基因的有关信息：基因的 序列、基因在 上的位置、基因的 产物mRNA、基因的 产物蛋白质等特性获取目的基因。 2 利用 扩增目的基因： PCR：是一项在生物体外 核酸合成技术。 条件：已知目的基因的 序列。 过程：目的基因DNA受热 ，与 结合，然后在 ______的作用下进行。 ⑤方式：指数扩增 2n n为扩增循环的次数 思考：PCR技术与DNA复制的异同点？ 3 人工合成法：基因较小，核苷酸序列已知，可以人工合成。 1）反转录法：以目的基因转录成的信使RNA为模板，反转录成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成双链DNA，从而获得所需的基因。 2）根据已知的氨基酸序列合成DNA法：根据已知蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的信使RNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测出它的结构基因的核苷酸序列，再通过化学方法，以单核苷酸为原料合成目的基因。 （二）基因表达载体的构建——基因工程的核心 1．目的： 2．表达载体的组成：目的基因+ + +标记基因等。 （1）启动子：是一段有特殊结构的 ，位于基因的 ，它是 结合的部位，驱动基因转录产生mRNA。 （2）终止子：也是一段有特殊结构的 位于基因的 ，终止 。 （3）标记基因： 。常用的标记基因是 。 3不同的受体细胞及目的基因导入受体细胞的方法不同，基因表达载体的构建上也会有所差别。 在构建过程中需什么工具？只考虑两两结合，可以产生几种重组DNA分子？ 绘一个基因表达载体示意图： 三 将目的基因导入受体细胞 转化的概念： 1．将目的基因导入植物细胞 采用最多的方法是 ，其次还有 和 等。 1 农杆菌转化法 农杆菌特点：易感染 植物和植物，对___________植物没有感染力；Ti质粒的可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上。 转化：目的基因插人 农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以和。 2 基因枪法 基因枪法：是单子叶植物中常用的一种基因转化方法，但是成本较高。 3 花粉管通道法 花粉管通道法：这是我国科学家独创的一种方法，是一种十分简便经济的方法。（我的的转基因抗虫棉就是用此种方法获得的） 2．将目的基因导入动物细胞 1 方法： 注射技术。 2 操作程序：目的基因表达载体 →取卵 受精卵 →显微注射→注射了目的基因的受精卵移植到性动物的 ____________内发育→新性状动物。 3．将目的基因导人微生物细胞 1 原核生物作为受体细胞的原因是 ，最常用的原核细胞是 2 转化： 处理细胞→ 细胞→表达载体与感受态细胞混合→_________ 细胞吸收DNA分子。 四 目的基因的检测与鉴定 1．检测: 1 首先要检测 ，方法是采用 。 2 其次还要检测 ，方法是采用 。 3 最后检测 ，方法是从转基因生物中提取 ，用相应的 进行杂交。 2．鉴定:有时还需进行 的鉴定。如一个抗虫或抗病的目的基因导入植物细胞后，是否赋予了植物抗虫或抗病特性，需要做 实验。 东宁一中 高二生物学科导学案 编制人：龚力道 审核人：路瑞发、王辉、梁婧 审批：高二生物备课组 1 课题：§1.2 基因工程的基本操作程序 第 页 千淘万漉虽辛苦，吹尽狂沙始到金