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肿瘤相关基因分析方法 综述· 肿瘤相关基因分析方法 同济医科大学附属协和医院《武汉430030)胡慈综述易粹琼王家耽审校 肿瘤的发生发展是多因素多基因长期作用的结果。克隆 肿瘤相关荃因的方法有多种，且根据不同的分类有不同的侧重 点。本文以研究对象水平的不同概括为三大类:第一类从DNA 水平入手;第二类以mRNA水平为基础;第三类以蛋白质水平 为基础。 以DNA水平为甚础 肿瘤相关基因改变的类型多种多样。有的基因在基因组 结构上发生改变，如发生基因重排，抗癌基因丢失，原癌基因突 变等。从DNA水平入手即可克隆这类基因。方法分述于下。 1.1定位克隆 定位克隆是当前克隆肿瘤 易感基因的一条主要途径。它的一般程序包括:首先采用分离 分析确定疾病的遗传方式，然后通过对家系进行连锁分析把遗 传易感基因定位在染色体的特定区带，再通过染色体步移或染 色体跳步获取覆盖这一区域的DNA克隆群并在此基础上获得 候选基因的cDNA片段，最后分析这些候选基因在患者和其它 家系成员中体细胞和生殖细胞的突变情况以找到真正的肿瘤 易感基因。 1.1.1基因在染色体上的定位这是关键性的步骤，工作量 较大，周期也较长。大部分类型肿瘤为多基因疾病，基因之间 相互作用方式难以预测，需大量精确的家系资料。 基因定位的主要手段是连锁分析，即通过基因与染色 体上多态性DNA标记之间的重组系数来估计两者之间的距 离。用于