基于vba的酶免数据处理程序设计.docVIP

基于VBA的酶免数据处理程序设计 作者：栀子花开 0前言 笔者所在实验室主要从事动物疫病监测及畜产品安全监测，频繁使用酶标仪检测各类动物疫病免疫抗体及兽药残留快速检测。酶标仪数据处理历经手工输入数据计算、专用软件获取数据并计算、通用软件获取数据并计算等阶段，其中某通用软件效果较好，但还是存在着一些不足。2015年底电脑操作系统崩溃，重装系统及软件后向作者索取序列号时才发现，原来免费使用的某通用软件已经向商业化转型。鉴于该软件还存在着一些不足，尤其是输出的EXCEL文件存在被篡改的可能，笔者决定利用原来自学的VBA基础，自行开发基于VBA的酶免数据处理程序。经过十余个工作日的编程，数据处理程序终于杀青，达到预想的效果，命名为《ELISA小帮手》V1.0。 1酶免基本原理 酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）是酶免疫测定技术中应用最广泛的技术。其基本原理是将抗原或抗体结合到某种固相载体的表面，并使其保持免疫活性；然后使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性；测定时把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应；用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅作定性或定量分析。由于酶的催化频率很高，故可极大地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。 早期的酶免试验由于特异性和灵敏度不够高而妨碍了其在实际中的应用，但随着相关新技术的不断问世、不同测定原理的出现、试验材料的不断改变，特别是采用基因工程方法制备包被抗原，使酶免试验的特异性和灵敏度都大幅度提高。加之各种酶免分析仪制造工艺的逐渐成熟，使得测定变得更为稳定和准确，从而使酶免试验成为广泛应用的检测方法之一。目前该方法已被广泛应用于多种细菌和病毒等疾病的诊断，以及禁用物质和兽药残留的快速检测。 2酶免数据处理方式 酶标仪通常输出的数据是受检标本的吸光度值（即OD值，以下未注明处数据均指OD值），如何判定受检标本中受检物质的存在情况及数量，需要对数据进行处理。根据处理方式的不同，可以简单地将酶免数据处理方式划分为以下几个阶段： 初始阶段：酶标仪通过内置打印机将受检标本的OD值打印在热敏打印纸上，然后手工计算结果，处理效率很低。随着办公自动化软件的普及，逐渐发展成为手工将OD值输入EXCEL表格，通过公式计算结果，处理效率有所提高。 发展阶段：随着计算机技术的发展和酶标仪制造工艺的提高，酶标仪生产厂家逐步推出专用的酶免数据处理软件，酶标仪的数据通过接口（RS-232、RS-485或USB等）传输到处理软件，由处理软件进行简单的公式计算得到结果。此阶段数据处理效率得到极大提高，但处理软件一般均针对专门的酶标仪设计，通用性不强，而且数据计算能力不强，遇到布局较复杂的试验无能为力。 成熟阶段：针对上述阶段的缺点，市场上出现了一些通用数据处理软件，可兼容多种不同厂家的酶标仪，数据计算公式也更加丰富。 3程序总体设计 3.1需求分析 酶免数据处理程序需满足以下需求： ——程序可兼容多种酶标仪； ——程序包含多种模板，可根据不同项目选择不同的模板； ——程序运行后自行获取酶标仪数据，并根据模板中预置的公式计算结果和定性判定； ——程序完成数据获取、计算和判定后，新建EXCEL文件载入上述数据，以“检测项目名称+板号+日期+时间”为文件名保存后自动关闭； ——新建的EXCEL文件在关闭前自动加密，防止未授权人员篡改数据； ——新建的EXCEL文件中自动记录读板时间，文件名包含读板时间，与EXCEL文件属性中的文件建立时间对应，如其中任一时间不同，则可能已被篡改； ——程序设置工程密码，防止未授权人员篡改源代码； ——为保护知识产权，防止程序被随意扩散，程序只有在注册后方可长期使用；未注册只有有限次使用，超过次数后启动时执行自毁程序。 3.2可行性分析 3.2.1技术可行性 本程序运用了VBA编程、EXCEL模板设计、RS-232总线应用等技术，除EXCEL模板设计较为熟练外，VBA编程稍有涉猎，RS-232总线运用完全是门外汉。但如今的互联网技术相当发达，各种网络教程琳琅满目，只要肯下功夫，门外汉完全可以通过自学成功入门。所以通过这些技术设计酶免数据处理程序是可行的，并且具有一定的创新性。 3.2.2经济可行性 目前市面上的酶免数据处理软件大多由酶标仪厂家自主研发或OEM，以实现数据的自动化处理，但通用性不强，而且不同的酶标仪兼容性很差。少数几款酶免数据处理通用