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Principle : antigen + antibody Two necessary conditions: specificity visibility 目的原理 本法是指用酶标记抗体或酶标记抗抗体进行抗原抗体反应，从而将抗原抗体反应的特异性与酶对底物高效催化作用结合起来，根据酶作用底物后显色，以颜色变化判断实验结果，可经酶标测定仪作定量分析，灵敏度可达微微克（pg）水平。 常用于标记的酶有辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase, HRP）和碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase, AP），它们与抗体结合不影响抗体活性，这些酶具有一定的稳定性，制成酶标抗体可保存较长时间。 酶联免疫吸附实验（Enzyme linked immunosorbent assay, ELISA），简称酶标法，是根据酶免疫测定原理发展的一种技术。基本的方法有三类，即间接法、双抗夹心法和抗原竞争法。 实验步骤 1.?包被：取羊抗鼠IgG包被单抗20ug,用0.01M Tris-HCl稀释至10ml,加入96孔板中,每孔100ul,4℃过夜； 2.?封闭：用洗涤液 含0.01%Tween-20的0.01M PBS 洗涤两次,然后加入封闭液 含15%小牛血清的0.01M PBS ,每孔300ul,37℃,孵育2h； 3.加样品：洗涤两次, 加入标准品鼠IgG 1