动物细胞融合与单克隆抗体-2013讲解.pptVIP

5. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是 （ ） ①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞　 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞 A.②④ B.①③⑤　　 C.①②③④ D.②③ C 6.“生物导弹”是指 （ ） A.单克隆抗体 B.杂交瘤细胞 C.产生特定抗体的B淋巴细胞　　 D.在单克隆抗体上连接抗癌药物 D A 、 B细胞为动物细胞,请据图回答问题: A细胞 B细胞 C细胞 D细胞 1 若A细胞为骨髓瘤细胞B细胞为淋巴细胞,那么D细胞称为 细胞,D细胞具有两个亲本细胞的特征,一方面因具有骨髓瘤细胞的 性质,通过 方式产生大量细胞,我们称之为 过程;另一方面能分泌大量的抗体,我们把该过程分泌的抗体称 . 杂交瘤 连续分裂 有丝分裂 单克隆 单克隆抗体 练一练 2 D细胞中产生的抗体其化学本质是 ,合成该物质的场所是 ,它是由 控制合成的,合成过程包括 和 两个重要步骤. 球蛋白 核糖体 基因 转录 翻译 3 D细胞中产生的抗体具有 作用,与血清抗体相比其优越之处在于 强 高. 免疫 特异性 灵敏度 4 若A为人细胞,B为鼠细胞,用同位素标记A细胞膜上的蛋白质,B不标记,在C细胞时,检测结果发现整个细胞一半有放射性另一半没有.在D细胞时,检测结果发现整个细胞都有放射性,请解释原因 . 构成细胞膜的蛋白质分子大都可以流动 请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来。 * 1.怎样获得能够产生抗体的B淋巴细胞？ 2.骨髓瘤细胞具有什么特性？ 3.科学家期望杂交瘤细胞有怎样的性状？ 4.细胞融合有哪几种情况发生？怎样筛选出杂交瘤细胞？ 5.杂交瘤细胞在体外培养要用到那种细胞工程技术？ 2.2 动物细胞工程 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 1970年，有两位科学家 做了一个著名的实验： 人—鼠细胞融合的实验。 人—鼠细胞是怎样实现融合的？动物细胞融合有什么实践意义呢？ 从一个实验说起： 植物细胞A 植物细胞B 去掉细胞壁 去掉细胞壁 原生质体A 原生质体B 原生质体融合 杂合的原生质体 再生出细胞壁 杂种细胞 细胞分裂 分化发育 愈伤组织 杂种植株 温故知新: 植物体细胞杂交过程 （一）动物细胞融合 1.概念： 动物细胞融合（cell fusion）也成细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 融合和形成的具有原来两个或多个细胞遗传物质的单核细胞，称为杂交细胞。 2.原理： 细胞膜的流动性 动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理 相同,两者的融合过程是否也一样？ 阅读课本P52及识图2-23 诱导方法： 物理方法： 化学法： 生物法： 灭活的病毒 电激等 聚乙二醇（PEG 诱导融合的方法有哪些？ 3.融合过程： 为什么灭活的病毒能作诱导剂？ 3.融合过程 灭活病毒诱导细胞融合的原理： 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏这些病原体的抗原结构。 P52生物技术资料卡 有梦想，才会有创造！ 生物种间杂交想像图 成功的动物细胞融合实例: 如人—小鼠、人—兔、人—鸡、鼠—兔、鸡—鼠等上百种融合细胞。 4.意义： 突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原理 融合前处理 使用的酶 诱导方法 主要用途 细胞膜的流动性细胞的全能性 细胞膜的流动性 纤维素酶、果胶酶 胰蛋白酶 物理方法 （离心、振荡、电激） 化学方法（PEG） 物理、化学方法 灭活的病毒 获得杂种植株 制备单克隆抗体 去除细胞壁后诱导原生质体融合 使细胞分散后诱导细胞融合 植物细胞杂交与动物细胞融合的比较 阅读思考 1. 抗体由何种细胞产生？如何产生? 2. 抗体的化学本质是什么？ 与抗原作用的特点？ 主要分布在哪里？ 3.用传统的方法如何获得抗体？ （二）单克隆抗体 抗体的传统生产方法 该法制备抗体的特点： 产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。 从血清中分离抗体 动物体内 多种抗体 抗原 资料分析 人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。 单克隆抗体：单个B细胞克隆产生的化学性质单一、特异性强的抗体。 （1）单克隆抗体概念 提示1：对B