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正交试验在医药科研中的应用 屠鹏飞（北京医科大学药学院） 　　一、正交试验法的作用 表1、乙酰苯胺不同磺化试验结果 试验号 反应温度(℃) 反应时间(小时) 硫酸浓度(％) 操作方法 收率(％) 1 50 1 17 搅拌 65 2 50 1 27 不搅拌 74 3 50 2 17 不搅拌 71 4 50 2 27 搅拌 73 5 70 1 17 不搅拌 70 6 70 1 27 搅拌 73 7 70 2 17 搅拌 62 8 70 2 27 不搅拌 67 　　从上述8种试验结果来看，第2号工艺最好，因为收率最高。4号、6号工艺比2号收率只低1％，其它5种工艺则相差较大,所以也可以说2号、4号、6号三种磺化工艺较好。 　　上述分析是就事论事的分析方法，分析结果的准确性不大，缺乏科学性。上述试验只能说所做的8组试验中，2号最好，但只做一次试验，可信度只有1％。如果要达到可信度95％以上，就必须做100次试验，有95次都表明2号是最好的，才能说明问题，事实上没有人会这样做。或者做较多次的试验，比如10次，再采用统计方法，如果P＜0.05，则说明2号与其它各组有显著性差异，否则不能说明问题，从上面结果来看，2号与4号、 6号差距不大，4号、6号与其他各组也差距不大，很难有显著性差异(P＜0.05)，即使有显著性差异，也只能说明这8组中2 号最好，不能说明总体试验中，2号为最好。 　　如果采用正交试验法，可归纳成表2的试验方案： 表2 乙酰苯胺磺化试验正交设计 因子 水平 Ａ 反应温度(℃) Ｂ 反应时间(小时) Ｃ 硫酸浓度(％) Ｄ 操作方法 1 50 1 17 搅拌 2 70 2 27 不搅拌 　　表2的试验如果全面互相搭配进行，则要做16组，如果采用正交L8(27)法,只需做8组试验，就可得出二点可信度达95％的可靠结论。 　　①影响收率的关键是硫酸浓度，即硫酸一定要采用27％，磺化温度如果采用50℃，则时间要采用2小时；磺化温度如果采用70℃，时间要采用1小时，不然收率就低。搅拌与否，对收率没有显著的影响。 　　②最优化工艺不是2号，而是4号和6号。经进一步计算，4号和6号比2号平均收率高出4.73％。 从上述实例可以看出，采用正交法，既省力，又可得出科学、可信度高的结果。 　　二、正交试验法的基本特点 　　用正交法来安排试验，在于安排试验的这种正交表具备均衡分散，整齐可比特性。 　　(一)试验均衡分散 在说试验均衡分散之前，先介绍两种概念。 　　１、因子与水平 　　完成一项研究，或一个产品的条件叫因子(因素)。例如煮大米饭，是米、水、火三个条件参与完成的，那么米、水、火就是煮饭的三个因子(因素)。 　　水平是指因子(因素)所处的不同状态，即试验点。例如煮饭是早米好吃，还是用晚米好吃，早米、晚米就是不同的水平，同理每公斤米加1公斤还是加1.25公斤水好，火是大火好还是文火好，都是不同的水平。 　　如果要做煮饭试验，用正交试验法将因子和水平列成表3。 表3 煮饭试验的表头设计 因子 水平 Ａ 米 Ｂ 水 Ｃ 火 1 早米 1kg 大火 2 晚米 1.25kg 文火 　　２、正交表 　　正交表是指正交试验法中安排试验，分析试验的一种得力工具，每张正交表，都有自己的名字，并反映出表的具体内容。以L4(23)为例： 　　2水平有：L4(23)、L8(27)、L12(211)……L64(263) 　　3水平有：L9(34)、L18(37)、L27(331)………L81(340) 　　4水平有：L16(45)、L32(48)、L64(421) 表4 L4(23)正交表 列号 试验号 1 2 3 1 1 1 1 2 1 2 2 3 2 1 2 4 2 2 1 　　所有正交表都具备以下两个数学性质： 　　①任何一列，各水平出现的次数相同。 　　②任何两列的同一横行，有序数对出现次数相同。上述两点，缺少任何一点，表就不正交了。 　　３、均衡分散：一个整体的全面试验中，用正交表挑出来的这部分试验分布均匀，代表性强，所以只要通过这部分试验，就能反映全部试验情况。 　　下面仍以煮饭为例： 任何一个面上都有二个试验点 任何一条线上都只有一个试验点 所有因子的水平一视同仁 　　(二)数据计算简单 表5 金、银、铜球重量试验 因子 水平 A 铜球 Ｂ 银球 Ｃ 金球 1 铜甲(25g) 银乙(30g) 金甲(22g) 2 铜乙(21g) 银甲(20g) 金乙(34g) 表6 金、银、铜球重量正交试验表 表头 试验号 A 1 B 2 C 3 试验结果(g) 1 1 1 1 77 2 1 2 2 79 3 2 1 2 85 4 2 2 1 63 K1 156 162 140