第05章细菌的遗传变异2小时讲解.ppt

第5章 遗传（heredity 变异 variation 基因型 genotype 表型 phenotype 基因型变异 genotypic variation ：BCG 表型变异 phenotypic variation ：细菌L型 一、细菌的遗传物质 质粒具有自我复制的能力。 质粒编码基因产物决定某些特定性状。耐药性、致育性、致病性 质粒可自行丢失与消除。非生命所必须，性状丢失。 质粒通过多种方式转移。接合和非接合性 质粒可分为相容性与不相容性 1 致育质粒（F质粒） 2 耐药性质粒 编码细菌对抗菌药物或重金属盐类的耐药性。一是接合性耐药质粒（R质粒），另一是非接合耐药性质粒； 3 毒力质粒（Vi质粒） 编码与该菌致病性有关的毒力因子； 4 细菌素质粒 编码细菌素；col质粒 5 代谢质粒 编码相关的代谢酶。 插入序列 750～1550bp，最短的转座因子，两端反向重复序列，重组酶的识别位点。中心有转位酶基因，与转座有关。染色体和质粒具有。 转座子 transposon，Tn ：2～2.5kb,两端为IS,中心有与转位无关基因，如毒素基因、耐药基因等，可转移，转座使插入处基因完整性破坏，基因结构分子重排。 常见的插入序列和转座子 固有的遗传单位，位于细菌染色体、质粒或转座子上，是运动性的DNA分子，可捕获外源性基因。成为功能性基因表达单位。 两端为保守末端，中间为可变区，含一个或多个基因盒，一个结构基因（耐药基因）和碱基对，基因盒是单一的可移动的DNA分子，只有当它被整合子捕获并整合到整合子中才能转录。 整合子含有3个功能元件：重组位点；整合酶基因；启动子，位于5”保守末端。 通过转座子或接合性质粒，使多种耐药基因在细菌中进行水平传播 一、转化（transformation）： 供体菌裂解释放的DNA片段被受菌直接摄取，使受体菌获得了新的性状。 影响因素： 供受菌基因型： 同源性；亲缘关系近，转化率高 受菌的生理状态： 感受态（competence），正电荷，细胞膜通透性增高。人工诱导。 环境因素：Mg2＋、Ca2＋等可促进转化 Hfr（高频重组菌株）： F质粒可以游离，也可以与染色体整合 有性菌毛，接合方式，转移染色体 细菌染色体转移频率高，F质粒低 F质粒位于染色体末端，接合过程受因素影响，F+质粒不可能进入F-，F-很少转化为F+。 受体菌获得供体菌性状 F质粒也可以脱落，终止Hfr状态。 R质粒的接合 三）转导（transduction） 突变的性质： 突变率：10-6～10-9 自发突变与诱发突变 突变与选择 回复突变与抑制突变 诊断困难 H→O变异：如伤寒沙门菌鞭毛 S→R变异：消失荚膜或多糖 抗原性改变 毒力下降，生化反应改变 治疗困难：耐药 预防：BCG 基因工程 细菌的遗传物质包括哪些？ 遗传性变异与非遗传性变异的区别？ 转化、转导、接合、溶原性转换的概念？ 质粒的主要特征？ 什么是Hfr与F’？ 何谓“感受态”？ 什么是普遍性转导与局限性转导？ 彷徨试验和影印实验的意义？ 突变型细菌及其分离： 耐药性突变型 药敏试验 营养缺陷突变型 营养物质筛选 条件致死性突变型 ts株。 发酵阴性突变型 乳糖发酵试验 四、实际应用 载体：质粒，噬菌体 工程菌和酶：限制性内切酶，连接酶 选择目的基因，细菌中表达，如胰岛素、白介素、干扰素等 基因工程疫苗 思考题 * * 细菌的遗传变异 基因型和表型变异的比较 基因型变异 表型变异 基因结构 变化 未变 可逆性 不或极少 可逆 稳定性 稳定 不稳定 环境影响 涉及细菌数 不受影响 受影响 个别 全体 相对较小，有一个起始复制位点 几个基因组成操纵子，转录一条mRNA，各自的蛋白质，几个操纵子由一个调控基因 regulatory gene 调控。 基因连续，没有内含子 intron ，转录不需加工剪接。 不编码的DNA比真核细胞少，大部分DNA编码蛋白质。 与病毒不同，少数基因重叠现象，大部编码基因不重叠。 结构基因是单拷贝，编码rRNA的基因是多拷贝的，快速合成蛋白质。 特点 质粒DNA的特征 质粒 plasmid 是细菌基因组中能改变自身位置的一段DNA序列，这种转座作用可以发生在同一染色体上，也可在染色体之间或质粒之间，甚至在染色体和质粒之间。转座酶 transposase 插入序列（insertion sequence 转座子 transposon 转座因子 （transposable element IS bp Tn 耐药或毒素基因 IS1 768 Tn1 AP（氨苄青霉素） IS2 1327 Tn6 Kan（卡那霉素） IS3 1300 Tn10 Tet（四环素）