2009年10月27日.docVIP

2009年10月27日?星期二? 首页? ┆ 课程概况? ┆ 申报材料? ┆ 授课点播? ┆ 教学课件? ┆ 教材教案? ┆ 实验平台? ┆ 教学研究? ┆ 教学论坛? ┆ 相关资源? 当前位置： 肉桂提取物对四氯化碳致急性肝损伤小鼠的保护作用 2009-06-16 15:21 口腔医学系四队 黄何华 刘梦园 朱宏 1 ?实验目的及意义 肉桂 Cinnamomum cassia Pres1 ，又名玉桂，系樟科樟属，常绿乔木，树高达1O多米。肉桂药用始载于《神农本草经》，列为上品。“味辛温，主百病，养精神，和颜色，利关节，补中益气。为诸药先聘通使，久服通神，轻身不老。面生光华，眉好常如童子。”肉桂在《本草纲目》列于木部第三十四卷：“坚筋骨，通血脉，宜导百药，久服，神仙，不老”常用于阳痿，宫冷，腰膝冷痛，肾虚作喘，阳虚眩晕，目赤咽痛，心腹冷痛，虚寒吐泻，寒疝，经闭，痛经。同时肉桂也是一种使用极为普遍的香料。它可用做动物性食物或汤菜的调味剂．并常与花椒共粉而用．也可以用做调配各种香型 如薰衣草香型、香薇型等 的香精。现代研究表明，肉桂具有抑制免疫、降血脂、抗氧化、抗真菌、抗肿瘤、保护肝脏、抑制中枢等多种药理活性，可用于心绞痛、肝炎、老年性痴呆、恶性肿瘤等病症。本实验拟观察肉桂对四氯化碳所致急性肝损伤的防治作用，并初步探讨其作用机理。 2? 实验内容 通过实验记录肝天冬氨酸转氨酶（AST）、丙氨酸转氨酶 ALT 、丙二醛 MDA 、超氧化物岐化酶 SOD 、肝指数（HI）等指标，观察光镜下肝组织损伤程度，验证肉桂提取物对CCL4致急性肝损伤小鼠的保护作用，初步探讨肉桂提取物对肝损伤的保护作用机理。 3 材料与方法 3．1 动物药品及试剂 小鼠40只，雌雄各半，体重18~25g/R，本校动物中心提供；丙二醛 MDA 、丙氨酸转氨酶 ALT 、天冬氨酸转氨酶 AST 、超氧化物岐化酶 SOD ，检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所；肉桂购自西安同仁堂药店，肉桂水煎液：肉桂 1OOg 水提取，浓缩至1g生药／ml。其余为国产分析纯生化试剂。 3．2 仪器 匀浆器，分光光度计，天平等。 3. 3 方法 小鼠40只，随机分为对照组、模型组、治疗1组、治疗2组和治疗3组。治疗1组肉桂水煎液大剂量组（按10ml/kg给药）、治疗2组肉桂水煎液中剂量组（按5ml/kg给药）、治疗3组肉桂低煎液大剂量组（按2.5ml/kg给药）灌胃量为10ml/kg，对照组和模型组均灌胃等体积生理盐水，各组均每天一次，连续10天。第11日，正常对照组腹腔注射豆油 10ml/kg体重 ，其余各组腹腔注射0.15%CCL4豆油溶液 10ml/kg体重 。 腹腔注射12h后禁食不禁水，24h后断头取血，离心，测定血清中丙氨酸氨基转移酶 ALT 和天门冬氨酸氨基转移酶 AST 活性。采血后，立即取出肝脏，用滤纸吸干，称重，取少部分肝脏制备10%的匀浆液，5000r／min离心10min，取上清液，在冰箱保存，以测SOD活性及MDA含量，剩余部分肝脏，10％甲醛固定，按常规方法制备切片，在光镜下进行病理学检查。 统计学处理所得数据用SPSS软件进行方差分析，以R 0.05为检验标准 4? 预期结果 4．1 肝指数 与空白对照组相比，模型组肝指数增大，各给药组与模型组比较肝指数均降低，治疗1组降低最明显。 4．2 SOD、MDA、AST、ALT 模型组与空白对照组比较，血清ALT、AST活性明显升高。与模型组相比，各给药组血清ALT、AST水平均降低，治疗1组降低最明显。与空白对照组相比，模型组肝组织中MDA明显增高，SOD明显降低。各给药组与模型组相比，肝组织MDA降低，SOD增高，治疗1组变化最明显 4. 3 病理切片 在光镜下，对照组肝小叶结构清晰，肝细胞索状排列规则，肝细胞结构及形态正常。CCL4模型组肝细胞明显肿胀变性，肝细胞索紊乱，小叶中可见点状肝细胞坏死，细胞界限不清，有气球样变细胞，并出现大量炎症细胞浸润。治疗3组肉桂水煎液低剂量组肝细胞排列尚整齐，部分肝细胞出现轻度细胞水肿与脂肪变性，可见到点状肝细胞坏死，伴有中性粒细浸润。治疗1、2组肉桂水煎液大、中剂量组肝细胞索排列较整齐，部分肝细胞出现轻度细胞水肿，较模型组明显减轻，肝细胞排列较规则。 小鼠（实验动物中心） 120元 3×40元 超氧化物歧化酶（SOD）测试盒 160元 微量丙二醛（MDA）测试盒 120元 谷丙转氨酶测试盒 30元 谷草转氨酶测试盒 30元 四氯化碳 免费 其他 50元 合计 510元 【关闭窗口 相关文章 第四军医大学基础医学教学实验中心电话：座机电话号码 Email:jxsyzx@fmmu.edu.cn