DGGE胶配置和银染方法(GENOLAB).docVIP

水平DGGE 选择35%-55%的水平DGGE的变性剂浓度范围，制备变性剂呈线性梯度增加，方向与电泳方向水平的水平胶，按照仪器使用说明进行操作。 35% 40% 55% 60% 40% Acrylamide/Bis 3 mL 3 mL 3 mL 3 mL 50x TAE buffer 0.3 mL 0.3 mL 0.3 mL 0.3 mL Formamide deionized 2.1 2.4 mL 3.3 mL 3.6 mL Urea 2.205 g 2.52 g 3.465 g 3.78 g dH2O To 15 mL To 15 mL To 15 mL To 15 mL 10% Ammonium Persulfate Ammonium persulfate 0.1 g dH2O 1 mL 50x TAE Buffer Reagent Amount Final Concentration Tris base 242.0 g 2 M Acetic acid, glacial 57.1 ml 1 M 0.5 M EDTA, pH 8.0 100.0 ml 50 mM dH2O 1,000.0 ml 电泳缓冲液温度为60℃，200 V预电泳10 min，每个加样孔加入含有等量加样缓冲液的PCR样品15 μL。在200 V电压下，电泳3 h。 染色