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课目：微生物生物学 第九章 微生物遗传（6学时） 目的要求： 通过本章的学习，使学生掌握细菌基因重组，真菌基因重组和微生物诱变育种的基本原理和方法。 要求掌握： 1、细菌基因重组的原理和方法。 2、真菌基因重组的原理和方法。 3、微生物诱变育种的原理和方法。 重点： 细菌的基因重组 难点： 低频转导，高频转导 准性生殖 课堂组织： 本章内容分三次讲完，每次2学时。 第一次讲授遗传物质DNA在微生物细胞中的存在位置（核、质粒、线粒体、叶绿体）、突变的机理，突变体的检出方法。 第二次讲授细菌基因重组（转化、转导、接合、原生质体融）、真菌基因重组（有性杂交、准性生殖）的原理和方法。 第三次讲授利用U、V、HNO2等物理化学因子诱导微生物发生基因突变的机理，进行诱变育种的方法。微生物在基因工程中的作用。板书加CAI讲授。 第九章 微生物的遗传和变异 遗传和变异是生物的本质 各种生物亲代的性状传给下一代的现象称为遗传。 亲代与子代之间，子代各个体之间在形态结构或生理机能方面的差异称为变异。遗传是相对的，而变异是绝对的。 研究生物遗传与变异的科学称为遗传学。 微生物的遗传在本质上与高等生物基本相同，但又有其自身的特点，主要表现在： 1. 微生物细胞个体小，结构简单，容易受环境条件影响，个体容易发生变异，加之微生物繁殖速度快，有利于自然选择或人工选择变异株。 2. 微生物的化学组成简单（如病毒只有蛋白质，核酸，部分有脂质和多糖）有利于从分子水平进行遗传本质的研究。 3. 微生物繁殖快，世代时间短，可大大缩短实验时间。 4. 微生物的变异容易识别，例如营养缺陷型突变体较容易在不同营养成分的培养基上培养检出。 基于上述特点，微生物被广泛用作分子生物学和分子遗传学的研究材料，这些研究结果又大大推动了微生物学的发展。因此，微生物学目前已成为生物科学的前沿学科。 遗传变异的物质基础 决定微生物遗传的物质是什么，这个生物学上的重要问题直到本世纪40年代通过用细菌和病毒作实验，才从根本上解决。 细菌的转化实验： 证明遗传物质是核酸的实验有三个： 1. 细菌的转化实验 2. 噬菌体的侵染 3. 病毒的拆开和重建实验（TMV） 1928年英国的细菌学家格里菲斯首先发现了肺炎球菌的转化现 象。格里菲斯（Griffith）做了如下试验： 肺炎球菌有光滑型（S型）和粗糙型 R型 两种不同类型，每 类型中又有不同血清型： SⅠ RⅠ S（光滑型） SⅡ R（粗糙型） RⅡ SⅢ RⅢ RⅡ型活菌 注射健康的小白鼠 鼠不死 SⅢ 型活菌 注射健康的小白鼠 鼠死亡 SⅢ 型60℃加热杀死菌体 注射健康小白鼠 鼠不死 SⅢ 型60℃加热杀死菌体 混合注射健康白鼠 鼠死亡 RⅡ型活菌 从中分离出活的SⅢ 型菌 Griffith 称这一现象为转化现象，至于转化因子是什么，Griffith没有作出回答。 1944年美国科学家Avery 等人在Griffith的工作基础上，做了如下实验: + + + + + + 上述试验证明了生物体内决定遗传的物质是DNA。 二、DNA的结构与复制： 华特生和克里格（Watson and Crick）1953年提出了DNA双螺旋的结构模型，对DNA分子的空间结构，DNA的自我复制，DNA的相对稳定性与变异性以及DNA对遗传信息的储存与传递等都有了较好的解释，从而为分子遗传学奠定了基础。 DNA由四种核苷酸组成，每一种核苷酸均含环状碱基，脱氧核糖和磷酸根三种组分。四种核苷酸的差异仅在于碱基不同。四种碱基即： 腺嘌呤（A），乌嘌呤（G），胸腺嘧啶（T），胞嘧啶（C）。 四种碱基构成四种核苷酸： 腺苷酸、乌苷酸、胸腺嘧啶核苷酸和胞嘧啶核苷酸。 DNA分子就是许多由单个核苷核形成的多核苷酸长链。两条多核苷酸链彼此以一定空间距离，在同一轴上互相盘旋而形成一个双螺旋式扶梯，扶手代表两条磷酸、糖链，每条链均由脱氧核糖——磷酸——脱氧核糖——磷酸交替排列构成。每条长链的侧面是碱基，由脱氧核糖同它们连接，两条链的两个碱基之间则以氢键连接，宛如一个梯蹬。氢键的连接很弱，但数量很大，可以维持稳定的螺旋结构。 由氢键连接的碱基组合称为碱基配对，即A-T配对，G-C配对，表现为特异性的互补关系，DNA分子中共有四种碱基对，即A-T,T-A,G-C,C-G。A-TG-C之间有三个氢键。 一个DNA分子含有几十万或几百万碱基对。各对碱基上下之间的距离为0.34nm。每个螺旋包含10对碱基，共长3.4nm。 为了确保细胞DNA 中的核苷酸碱基顺序在传代中精确不变，以保持所有属性的遗传，在细胞分裂前，DNA必须精确复制。其复制过程首先是DNA的双链从一端开始，氢键逐渐裂开，分离成两条单链，通过碱基配对逐渐建立起完全互补的一套核苷