乳制品中维生素的测定.docVIP

乳制品中维生素的测定 由于乳制品的前处理困难,即样品处于乳化状态,无法过滤比色,钨酸钠是常用的生物沉淀剂,将之用于沉淀乳制品中的大分子物质,消除乳化现象,取滤液可用于维生素C的各类方法检测,本实验选用比色法测定，方法简单、快速、准确。 材料与方法 仪器 721型分光光度计;超声清洗机;水浴锅 试剂 钨酸钠溶液 （100 g/L） 溶解10 g钨酸钠于10 ml水中。其余试剂同GB/T5009.86-2003。 活性炭 将100 g活性炭加到750 ml 1 mol/L的盐酸中,回流1到2 h,过滤,用水洗至滤液中无铁离子 Fe3+ 为止,然后置于100e烘箱中烘干。 抗坏血酸标准溶液 溶解57.8 mg纯抗坏血酸 纯度99.99% 于50 ml 10 g/L草酸中,配成每ml相当于11.56 mg抗坏血酸。 抗坏血酸标准使用液 吸取1 mg抗坏血酸标准溶液于50 ml容量瓶中,用10 g/L草酸定容至刻度,配成每ml相当23.12ug抗坏血酸。 实验方法 原料预处理 准确称取一定量乳制品,以10 g/L草酸溶液溶解,移入250 ml容量瓶中定容。取出25 ml加入钨酸钠溶液至不再产生白色絮状沉淀为止。超声15 min加入活性炭0.2 g,充分振荡1 min。过滤,弃初滤液5 ml,滤液备用。 标准系列的配置 取100 ml带塞比色管,加入抗坏血酸标准使用液20 ml,加入钨酸钠0.3 ml,加入活性炭0.2 g,充分振荡1 min。过滤,弃初滤液5 ml,5 ml滤液备用。取10 ml带塞比色管,分别加入标准溶液0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0 ml,用10 g/L草酸补足2 ml,加硫脲0.5 ml,除0管外,加2、4-二硝基苯肼0.5 ml,沸水浴10 min,取出,冷却,0管补加2、4-二硝基苯肼0.5 ml,在冰水浴中每管缓慢滴加2.5 ml硫酸 9+1 ,混匀。室温放置30 min后,用1 cm比色杯,于500 nm波长下测吸光度。样品滤液从”用10 g/L草酸补足2 ml,...”,0始,同上操作。 超声试验 由于钨酸钠沉淀大分子时可能吸附或包容部分样品中的VC,从而导致含量偏低,所以当样品中加入钨酸钠后需进行超声处理15 min,使VC不被共沉淀,回收率高。经过试验发现,如果只是机械振荡,即使时间延长,回收率也只能达70%-80%。见表一。 标准曲线绘制试验 标准曲线浓度是根据实际工作所需调整至合适浓度,使之更能符合实验的要求。 Vc含量（ug） 0 4.624 9.248 13.872 18.496 23.120 吸光度 0 0.062 0.120 0.175 0.220 0.272 Y 0.0138+0.0112x r 0.9990 回收试验 应用本法对样品进行加标加标回收试验,回收率在91.4%—105.4%,见表2。 精密度试验 应用本法进行批内和批间精密度试验,RSD % ≦2.40。