临床免疫学与检验 第2章 抗原抗体反应多媒体课件.pptVIP

第二章 抗原抗体反应 第一节 抗原抗体反应的原理一、抗原抗体结合力二、抗原抗体的亲和性和亲和力三、亲水胶体转化为疏水胶体 第二节 抗原抗体反应的特点 一、特异性 二、可逆性 三、比例性 四、阶段性 第三节 影响抗原抗体反应的因素 一、反应物自身因素 二、环境因素 第四节 免疫学检测技术的类型 思考题 小结 二、环境因素 电解质: 生理盐水或缓冲液 酸碱度: pH6～pH9 温 度: 15℃～40℃，37℃最适 1．什么是抗原抗体反应？ 抗原抗体反应的原理是什么？ 2．抗原抗体的结合力有哪些？ 3．抗原抗体反应有哪些特点？ 4．如何理解抗原抗体反应的特异性和交叉反应？ 5．什么是抗原抗体反应的可逆性？有何应用？ 6．如何理解抗原抗体反应的亲和力和亲合力？ 7．抗原抗体反应体系中为何要确定抗原、抗体的最适比例？ 8．抗原抗体反应有哪些影响因素？ 9．基于抗原抗体反应的免疫学检测技术有哪些？ 10．什么是标记免疫技术？标记免疫技术有哪些类型？ 小结 * 第一节 抗原抗体反应的原理 抗原抗体反应:指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。 物质基础: 抗原表位与抗体高变区间的互补结合 抗原表位与抗体高变区的沟槽分子表面的结合 抗原抗体之间的结合力 亲水胶体转化为疏水胶体 静电引力 （electrostatic forces） 范德华引力:作用最小 （van der Waals interactions） 氢键:最具特异性 （hydrogen bond ） 疏水作用力:作用最大 （hydrophobic interactions） 抗原抗体结合力示意图 一、抗原抗体结合力 抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原决定簇之间相适应而存在着的引力，是抗原抗体间固有的结合力 亲和力(affinity) 抗原抗体亲和力示意图 二、抗原抗体的亲和力和亲合力 抗体结合部位与抗原表位之间结合的强度 亲合力(avidity) 抗原抗体亲合力示意图 可见反应 抗原抗体复合物 (疏水胶体) 电解质 抗原 (亲水胶体) 抗体 (亲水胶体) + 三、亲水胶体转化为疏水胶体 第二节 抗原抗体反应的特点 特异性 可逆性 比例性 阶段性 特异性：抗原与抗体结合反应的专一性 抗原抗体反应特异性示意图 分子基础:抗原表位与抗体分子高变区之间空间构型的互补性 一、特异性 两种不同的抗原分子具有部分相同或类似结构的抗原表位，可与彼此相应的抗血清发生反应 交叉反应（cross reactions） 抗原抗体交叉反应示意图 二、可逆性 可逆性：抗原与相应抗体结合成复合物后，在一定条件下又可解离为游离抗原与抗体的特性 影响因素： 抗体对相应抗原的亲合力－亲合力越高，结合越牢固，越不易解离 环境因素对复合物的影响－pH、离子强度 前带(prezone)：抗体过量 后带(postzone)：抗原过量 等价带(equivalence zone)： 抗原抗体比例合适 抗原抗体反应比例性示意图 比例性：抗原与抗体发生可见反应需遵循一定的量比关系 三、比例性 第一阶段：特异性结合阶段，反应快，不可见 第二阶段：反应可见阶段，反应慢，出现凝集、 沉淀和细胞溶解等现象 四、阶段性 第三节 影响抗原抗体反应的因素 抗原、抗体反应物的自身因素 环境因素 一、反应物自身因素 抗原:理化性状、表位种类和数目 抗体:来源、特异性、亲和性、效价 同上 抗球蛋白试验 同上 间接凝集试验 观察凝集现象 直接凝集试验 凝集反应 结果判断 实验技术 反应类型 同上 补体结合试验 观察测定溶血现象 补体溶血试验 补体参与的反应 观察扫描沉淀峰、沉淀弧 免疫电泳技术 观察沉淀，检测浊度 液相沉淀试验 沉淀反应 第四节 免疫学检测技术的类型 结果判断 实验技术 反应类型 检测发光强度 发光免疫技术 检测酶底物显色 酶免疫技术 检测金颗粒沉淀 金免疫技术 检测放射性强度 放射免疫技术 检测荧光现象 荧光免疫技术 标记免疫反应 检测外毒素毒性 毒素中和试验 检测病毒感染性 病毒中和试验 中和反应 按实际用途分为: ①免疫组织化学技术(immunohistochemistry technique,IHCT) ②免疫测定(immunoassay) 按检测现象分为: ①放射免疫技术 ②荧光免疫技术 ③酶免疫技术 ④化学发光免疫技术 ⑤金免疫技术 按测定反应体系的物理状态分为: ①均相免疫测定(homogenous immunoassay） ②非均相免疫测定(heterog