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HPV分型试剂盒及市场各产品比较
HPV分型试剂盒
HPV目前市场上主要产品:
杂交法(达安19、凯普21、亚能23、透景26);实时荧光PCR(之江13种高危分型、港龙凯普亚能13种高危不分型、达安8个型定量);第二代杂交捕获法(HC2)等
2、操作方法:
①HPV所有厂家标本处理操作流程(包括之江生物,都大同小异):
②HPV实验:
A、杂交法:首先加样上PCR仪做扩增,上机时间大约一个半小时左右。PCR完成后做杂交,目前市场上有手工杂交和使用杂交仪杂交。操作时间2-4个小时。
B、第二代杂交捕获法(HC2): 原理是利用对抗体捕获信号的放大和化学发光信号的检测
,
C、荧光定量PCR:直接上机通过荧光信号累积实时监测整个PCR进程,之江生物是用多重PCR对标本进行准确的13个高危型的具体分型,其他不具体分型。
举例之江产品:
之江八管双通道仪器 双色荧光PCR仪器都可以用 :
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 B Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 C Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 D Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 E Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 F Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 G Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 H Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 一排八管做一个标本即可具体分型!
结果判断:
HPV核酸荧光PCR检测混合液 若FAM通道Ct值≤35,结果判断为 若VIC通道Ct值≤35,结果判断为 Mix1 16+56 HPV16 HPV56 Mix2 18+45 HPV18 HPV45 Mix3 35+59 HPV35 HPV59 Mix4 39+51 HPV39 HPV51 Mix5 58+52 HPV58 HPV52 Mix6 31 HPV31 Mix7 33 HPV33 Mix8 68 HPV68 ②四管四通道仪器(ABI7500、罗氏480、伯乐CFX96、SLAN96孔等四色荧光PCR仪器):
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 B Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 C Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 D Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 E Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 F Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 G Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 H Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 四管做一个标本即可具体分型!
结果判断:
HPV核酸荧光PCR检测混合液 若FAM通道Ct值≤35,结果判断为 若VIC通道Ct值≤35,结果判断为 若610通道Ct值≤35,结果判断为 若670通道Ct值≤35,结果判断为 Mix1 16+56 HPV16 HPV56 Mix2 18+52+58+31 HPV18 HPV52 HPV58 HPV31 Mix3 35+45+33+68 HPV35 HPV45 HPV33 HPV68 Mix4 39+51+59 HPV39 HPV51 HPV59
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