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UV-2401PC紫外分光光度计
UV-2500PC紫外分光光度计芘降解菌的生长曲线测定 实验步骤:
1 配置培养基,就是培养基,。2 按一定量分装到试管里(需要13*3支,3支一组),灭菌。3 冷却后取大肠杆菌悬液,用移液枪分别接种到试管培养基中4 把12组放入37度摇床培养,取一组马上测OD值,三个值取平均数,偏差太大者舍去5 在2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24小时后分别测其他组。如果无法在特定时间测,也要在那一时间将该组在摇床取出冷冻保存,能测时取出测量即可6 将得到的值换算后画图即可
紫外区,测细菌浓度的时候取少量样品,这些菌只能用来测浓度,不能他用,否则就算没被杀死,也可能诱导变异。另外,如果你要测生长曲线的话,要单独培养细菌来测,测完丢掉。无色的菌也可以测,紫外分光光度法的原理是物质对紫外线的选择性吸收,基于分子中价电子在能级之间跃迁所产生的吸收,与细菌的颜色无关
我做过了不是很难,数据比较变态,但图作出来还是有正确的走势的,是个时期都能显示出来
3、选择合适模式进行测定:单击工具栏“工作模式 acquire Mode ”按钮。
A、光谱扫描测量模式:
(1)单击工具栏“光谱 spectrum ”按钮,进入光谱扫描测量模式;
(2)单击工具栏“配置 configure ”按钮,选择“参数 paramters ”按钮,进入参数设定对话框,按要求进行参数设定;
Measuring Mode
测量模式
Abs
Recording Range
记录范围
0-2
Wavelength Range
波长范围
Scan Speed
扫描速度
fast
Slit width
狭缝宽度
2.0nm
Sampling interval
数据间隔
2.0nm
(3)在参比池和样品池中都放入参比液,盖好样品室盖,单击“Baseline”按钮,进行基线校正(参比液或测量波长范围改变后需重新校正);
(4)在样品池(前面)中放入待测样品溶液,单击“开始(start)”进行测定,扫描完毕后,出现对话框,输入文件名:起文件名进行结果保存。注意此时数据结果只保存在通道中。
(5)重复(4)测量其余样品。
(6)保存文件:单击工具栏“文件夹 File ”按钮,选择“通道 Channel ”按钮,按要求进行通道操作设定;选择“保存通道 Save Channel
Save Channel
保存通道
Erase Channel
抹去通道
Rename Channel
重名明通道
(7)数据处理:单击工具栏“操作 Manipulate ”按钮, 按要求进行数据操作设定;选择“数据打印 Date print ”按钮,或者是“峰值检出 Peak pick ”按钮进行数据处理。
B、定量测定模式:Quantitative(单波长标准系列法)
(1)单击工具栏“定量”按钮,进入定量测量模式;
(2)单击工具栏“参数”按钮,进入参数设定对话框,选定单波长标准系列法,输入波长,选定拟合方式为“线性”,采用浓度法,给定浓度单位,标样个数,标样浓度等参数设定;
(3)在参比池和样品池中都放入参比液,盖好样品室盖,单击“Autozero”按钮,进行校正(参比液或测量波长范围改变后需重新校正);
(4)在样品池中分别放入标样溶液,单击“测量”进行测定,程序自动给出吸光度值,并在右边的坐标下画出工作曲线;
(5)用标样建立好曲线后,按下Unknown 键进入未知样测定界面,在样品池中放入待测样品,按下测量按钮,仪器开始测量。 4、测量结束后,退出光度计应用程序,依次关闭计算机和光度计电源,样品室中放入干燥剂,盖好防尘罩,填写使用记录,关好水、电、门。
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